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(1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑 、 和渗透压等条件。由于...

(1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑        和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、        等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料。

(2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行    (填“消毒”或“灭菌”);操作者的双手需进行清洗和    ;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能   

(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的   

(4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的   

(5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是     

                                                                                      

(6)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及培养物必须经过    处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。 

点睛:本题综合考查微生物的培养条件、培养基种类和计数等知识,考查学生的识记能力和综合应用能力。

 

(1)温度 酸碱度 易培养 生活周期短 (2)灭菌 消毒 损伤DNA的结构 (3)比例合适 (4)鉴定(或分类) (5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生 (6)灭菌 【解析】(1)大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点,培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。 (2)灭菌使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,所以对培养基和培养皿进行灭菌,消毒使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物, 操作者的双手需要进行清洗和消毒, 紫外线能使蛋白质变性,还能损伤DNA的结构。 (3)稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养,应保证样品稀释的比例适合。 (4)对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定。 (5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生 (6)因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素,并可能导致肠道出现严重症状,使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。  
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考点分析:
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某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌数量,并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是(  )

A.利用平板划线法对细菌进行计数

B.用以石油为唯一碳源的培养基筛选

C.采用稀释涂布平板法分离菌种

D.称取和稀释土壤时应在火焰旁

 

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某同学在101、102、103倍稀释液的平均菌落数为2 760、295和46,则菌落总数

(个/mL)为(  )

A.2.76×104B.2.95×104

C.4.6×104D.3.775×104

 

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能够测定样品活菌数的方法是(  )

A.稀释涂布平板法B.直接计数法

C.重量法            D.比浊法

 

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下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是(  )

A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板

B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上

C.将实验组和对照组平板倒置,37 ℃恒温培养24~48小时

D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数

 

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某中学杨老师自制大蒜提取液,希望这种简便、经济的提取液能够高效地杀灭餐具上的细菌,杨老师完成了下面的探究实验:

(1)制作提取液:杨老师将大蒜榨汁后制成提取液,具体做法如下表所示。请根据表中数据,在表中的括号内填出1#提取液应加入的冷开水量:

大蒜提取液编号

1#

2#

大蒜(g)

350

350

冷开水(mL)

(  )

880

无色食醋(mL)

/

20

制备量

1 000 mL

1 000 mL

(2)使用方法:将餐具浸泡在提取液中10 min后取出冲洗。

(3)样品抽取:将经过    处理的滤纸贴在餐具表面1 min,然后将滤纸放到50 mL无菌水中,充分振荡后制成原液。再取1 mL原液加入    mL无菌水中摇匀制成10倍稀释液。

(4)分离及培养:用    法分离细菌。分别取1 mL原液和10倍稀释液,分别加到伊红-美蓝培养基中,用灭菌、消毒后的    (用具),将原液和10倍稀释液均匀涂布到整个平板上。每个浓度各做三个培养皿,其目的是   

本实验另设1 mL无菌水涂布在未接种的培养皿上为空白对照,原因是排除                       

最后在37 ℃下培养48 h。

(5)观察记录:设计1#提取液实验组的观察记录表。

(6)结果分析:统计数据,得到消毒前后的菌落总数变化(单位:cfu/cm2,每平方厘米样品中含有的细菌群落总数)

编号

条件

总份数

<1

1~10

10~102

102~103

103~104

>104

1#

取液

消毒前

30

0

0

0

3

18

9

消毒后

30

14

12

4

0

0

0

2#

取液

消毒前

33

2

0

0

3

12

16

消毒后

33

19

10

4

0

0

0

根据消毒前后的数据可知:                                                                 

2#提取液效果高于1#,分析可能的原因:                                                      

请你给老师提出需要进一步研究的问题:                                                   

 

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