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氯苯化合物是重要的有机化工原料,因其不易降解,会污染环境。某研究小组依照下列实验...

氯苯化合物是重要的有机化工原料,因其不易降解,会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(图1)筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌,培养基配方如表1。

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表1 培养基的组成

液体培

养基

蛋白胨

牛肉膏

氯苯

氯化钠

硝酸铵

无机盐

(无碳)

蒸馏水

Ⅰ号

10 g

5 g

5 mg

5 g

-

-

1 L

Ⅱ号

-

-

50 mg

5 g

3 g

适量

1 L

Ⅲ号

-

-

20~80 mg

5 g

3 g

适量

1 L

(1)配制Ⅱ号固体培养基时,除添加Ⅱ号液体培养基成分外,还应添加1%的   

(2)培养基配制时,灭菌与调pH的先后顺序是   

(3)从用途上来说,Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于    培养基和    培养基。在Ⅱ号培养基中,为SP1菌提供氮源的成分是      

(4)在营养缺乏或环境恶劣时,SP1的菌体会变成一个圆形的休眠体,这种休眠体被称为   

(5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养,得到生长曲线(如图2)。从图2可知SP1菌在          培养条件下最早停止生长,其原因是               

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(1)琼脂 (2)先调pH,后灭菌 (3)通用 选择 硝酸铵 (4)芽孢 (5)20 mg/L氯苯 碳源最早耗尽 【解析】 (1)固体培养基中需加入琼脂作为凝固剂。(2)先配制培养基后灭菌,调pH属于培养基的配制过程,故先调pH后灭菌。(3)从用途上看,Ⅰ号培养基为通用培养基(基本培养基);Ⅱ号培养基是选择培养基,以氯苯为唯一的碳源,其中为SP1菌提供氮源的成分是硝酸铵。(4)芽孢是在细胞质内高度浓缩脱水形成的抗逆性很强的球形或椭圆形的休眠体。(5)由图示可知SP1菌在20 mg/L氯苯培养条件下最早停止生长,20 mg/L氯苯可提供的碳源较少,碳源最早耗尽,影响菌体的生长繁殖。  
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考点分析:
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(1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑        和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、        等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料。

(2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行    (填“消毒”或“灭菌”);操作者的双手需进行清洗和    ;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能   

(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的   

(4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的   

(5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是     

                                                                                      

(6)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及培养物必须经过    处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。 

点睛:本题综合考查微生物的培养条件、培养基种类和计数等知识,考查学生的识记能力和综合应用能力。

 

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某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌数量,并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是(  )

A.利用平板划线法对细菌进行计数

B.用以石油为唯一碳源的培养基筛选

C.采用稀释涂布平板法分离菌种

D.称取和稀释土壤时应在火焰旁

 

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某同学在101、102、103倍稀释液的平均菌落数为2 760、295和46,则菌落总数

(个/mL)为(  )

A.2.76×104B.2.95×104

C.4.6×104D.3.775×104

 

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能够测定样品活菌数的方法是(  )

A.稀释涂布平板法B.直接计数法

C.重量法            D.比浊法

 

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下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是(  )

A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板

B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上

C.将实验组和对照组平板倒置,37 ℃恒温培养24~48小时

D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数

 

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