Question

酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取;果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果,某实验小组取无菌烟草幼叶,切成相同大小的小片,等量放入6支试管中,试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。

试管编号 项目	Ⅰ	Ⅱ	Ⅲ	Ⅳ	Ⅴ	Ⅵ
蒸馏水(mL)	2	0	1	1	1	1
缓冲液(mL)	0	2	1	0.5	0.5	0.5
果胶酶液(mL)	0	0	0	0.5	0	0
蜗牛酶液(mL)	0	0	0	0	0.5	0
纤维素酶液(mL)	0	0	0	0	0	0.5
实验结果 (绿色深浅程度)	-	-	-	+++	++++	++

(注:“+”越多表示绿色越深,“-”表示颜色无显著变化)

(1)实验过程中,需要轻摇试管,其目的是              ,使原生质体从叶小片中游离出来,以便观察悬浮液绿色的深浅。

(2)从绿色的深浅可推测:蜗牛酶液酶解效果最好,原因是蜗牛酶液含有           等多种酶。该实验中    是空白对照组,其设置意义是                                    。

(3)用网筛过滤原生质体到离心管内,离心后收集沉淀物,并用        洗涤。

(4)原生质体是否符合要求还需进行检验,其检验的方法是            。

Answer

(1)为了使细胞壁与酶充分接触,提高酶解效果

(2)果胶酶和纤维素酶 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 排除无关变量的干扰

(3)等渗溶液 (4)低渗涨破法

【解析】本题考查了酶的作用实验的设计及操作。(1)实验过程中,需要轻摇试管,可以使细胞壁与酶充分接触,提高酶解效果。(2)蜗牛以植物为食,所以蜗牛酶液中含有果胶酶和纤维素酶,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ没有添加酶溶液为空白对照组,其设置意义是排除无关变量的干扰。(3)离心后收集沉淀物,并用等渗溶液清洗,目的是保持细胞正常形态。(4)要用低渗涨破法来检验原生质体是否符合要求,若没有细胞壁则可以涨破,有则不能涨破。