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生物柴油是一种可再生的清洁能源,其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗,...

生物柴油是一种可再生的清洁能源,其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗,科学家发现,在微生物M产生的脂肪酶作用下,植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如下图)。

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(1)用于生产生物柴油的植物油不易发挥,宜选用        方法从油料作物中提取。

(2)筛选产脂肪酶的微生物M时,选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供    ,培养基灭菌采用的最适方法是    法。

(3)测定培养液中微生物数量,可选用           法直接计数;从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测    ,以确定其应用价值;为降低生物柴油生产成本,可利用    技术使脂肪酶能够重复使用。

(4)若需克隆脂肪酶基因,可利用耐热DNA聚合酶催化的    技术。

点睛:本题以生物柴油的制作过程为材料,主要考查植物有效成分的提取、微生物的培养、酶的固定化技术,考查学生获取信息能力和综合应用能力。

 

(1)压榨 萃取(注:两空顺序无先后) (2)碳源 高压蒸汽灭菌 (3)显微镜直接计数酶活性(或酶活力) 固定化酶(或固定化细胞) (4)PCR(或多聚酶链式反应,聚合酶链式反应) 【解析】(1)植物油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等,具体采用哪种方法要根据植物原料的特点来决定,用于生产生物柴油的植物油不易挥发,提取时不宜采用蒸馏法,而一般采用压榨、萃取法。(2)微生物生长需要碳源、氮源、矿质元素、生长因子和水。脂肪中只含碳不含氮,故属于碳源;高压蒸汽灭菌是培养基灭菌采用的最适方法。(3)测定培养液中微生物数量,一般采用平板记数法和显微镜直接计数法。具有活性的酶才有价值,所以,刚分离的酶应进行活性检测。使酶能够重复使用的方法是固定化酶技术。所以,(3)题三空答案依次为:显微镜直接计数、酶活性、固定化酶。(4)利用PCR技术可以扩增基因。  
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考点分析:
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回答下列关于微生物和酶的问题。

环境污染物多聚联苯难以降解,研究发现联苯降解菌内的联苯水解酶是催化多聚联苯降解的关键酶。

(1)下列培养基中能有效分离联苯降解菌的是    ,原因是                           

A.培养基(g/L):某生长因子2.0,(NH4)2SO4 2.0,K2HPO4 3.0,MgSO4 1.0,pH 7.4,多聚联苯50 mL

B.培养基(g/L):牛肉膏10.0,蛋白胨20.0,葡萄糖20.0,NaCl 5.0,pH 7.4

C.培养基(g/L):某生长因子2.0,淀粉20.0,NH4NO3 2.5,MgCl2 0.5,K2HPO4 3.0,多聚联苯50 mL,pH 7.4

进一步研究发现,不同的金属离子对联苯水解酶的活性有一定影响,结果见下表:

金属离子(mmol/L)

联苯水解酶相对活性(%)

对照组

100

Mn2+

123

Co2+

79

Mg2+

74

(2)①依据表中结果,金属离子    对该酶的活性有一定的促进作用。金属离子对酶的活性有促进或抑制作用。可能的原因是                                                                  

②通过酶工程可将联苯水解酶用于生产实践。酶工程通常包括酶的生产、       、酶的固定化和酶的应用等方面。酶固定化的好处是                                                     

③下图实线表示联苯水解酶催化的反应速率与酶浓度的关系,虚线表示在其他条件不变的情况下,底物浓度增加一倍,反应速率与酶浓度的关系,能正确表示两者关系的是   

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④红球菌和假单孢菌都能降解多聚联苯,但研究发现以每克菌体计算,两种菌降解多聚联苯的能力有所不同,对此现象合理的假设是               

点睛:本题综合考查有关微生物的培养和酶的固定和影响因素,考查学生获取信息能力、理解能力和综合应用能力。

 

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下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述,正确的是(  )

A.固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显

B.固定化酶的应用中,要控制好pH、温度和溶解氧

C.利用固定化酶降解水体中有机磷农药,需提供适宜的营养条件

D.利用固定化酵母细胞进行发酵,糖类的作用只是作为反应底物

 

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(多选题)如图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作,图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图,下列叙述正确的是(  )

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A.刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液

B.图1中X溶液为CaCl2溶液,其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠

C.图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触

D.图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中

 

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下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述,错误的是(  )

A.从酶的固定方式看,吸附法比化学结合法对酶活性影响小

B.作为消化酶使用时,蛋白酶制剂以口服方式给药

C.尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶,可以反复使用

D.将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗,目的是洗去CaCl2和杂菌

 

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酶在大规模产业化应用中的核心问题是固定化技术,而酶固定化所依据的基本原理在于酶具有(  )

A.热稳定性    B.催化高效性

C.催化特异性D.可反复使用性

 

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试题属性

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