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如图是从酵母菌获取某植物需要的某种酶基因的流程,结合所学知识及相关信息回答下列问题:

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(1)图中cDNA文库    (填“大于”“等于”或“小于”)基因组文库。

(2)①过程提取的DNA需要      的切割,B过程是   

(3)为在短时间内大量获得目的基因,可用    扩增的方法,其原理是       

(4)目的基因获取之后,需要进行        ,其组成必须有          以及标记基因等,此步骤是基因工程的核心。

(5)将该目的基因导入某双子叶植物细胞,常采用的方法是    ,其能否在此植物体内稳定遗传的关键是        ,可以用       技术进行检测。

(6)如果要想使该酶活性更强或具有更强的耐受性,需要对现有蛋白质进行改造,这要通过基因工程的延伸——蛋白质工程。首先要设计预期的    ,再推测应有的氨基酸序列,找到相对应的       

(7)除植物基因工程硕果累累之外。在动物基因工程、基因工程药物和基因治疗等方面也取得了显著成果,请列举出至少两方面的应用:                                                             

 

(1)小于 (2)限制酶 逆转录 (3)PCR技术 DNA双链复制 (4)基因表达载体的构建 启动子、终止子、目的基因(复制原点可不答) (5)农杆菌转化法 目的基因是否整合到植物细胞的染色体上 DNA分子杂交 (6)蛋白质结构 脱氧核苷酸序列 (7)乳腺生物反应器;体外基因治疗复合型免疫缺陷症 【解析】(1)一个基因文库中如果包括了该种生物所有的基因,我们把它叫做基因组文库;一个基因文库如果只包含一种生物的一部分基因,叫做部分基因文库,如cDNA文库。故cDNA文库小于基因组文库。(2)从酵母菌中提取目的基因,用到限制性核酸内切酶;以mRNA为模板合成cDNA属于逆转录。(3)PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术,其依据的原理是DNA双链复制。(4)基因表达载体的构建是基因工程的核心,一个完整的基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因及复制原点等。(5)将基因表达载体导入植物细胞常用农杆菌转化法,能否在此植物体内稳定遗传的关键是目的基因是否整合到植物细胞的染色体上,可以用DNA分子杂交技术进行检测。(6)蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。(7)考查基因工程应用的相关实例,答案合理即可。  
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考点分析:
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下列甲、乙两图为获得生物新品种的过程示意图。请据图回答。

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(1)检测目的基因是否转录出mRNA的具体方法是使用     与提取出的    做分子杂交。

(2)在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。乙图为获得抗虫棉技术的流程。A过程需要的酶有           。图中将目的基因导入植物受体细胞采用的方法是    。C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外,还必须加入     

(3)随着科技发展,获取目的基因的方法也越来越多,若乙图中的“抗虫基因”是利用甲图中的方法获取的,该方法称为        。图中①过程与细胞中DNA复制过程相比,该过程不需要    酶。③是在    (填“酶的名称”)作用下进行延伸的。

(4)离体棉花叶片组织经C、D、E成功地培育出了转基因抗虫植株,此过程涉及的细胞工程技术是       ,该技术的原理是       

 

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如图表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部分操作步骤。以下说法错误的是(  )

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A.利用含有四环素的培养基可将含分子Ⅱ的细菌筛选出来

B.Ⅲ是农杆菌,通过步骤③将目的基因导入植株

C.⑥可与多个核糖体结合,并可以同时翻译出多种蛋白质

D.①过程的完成需要限制酶和DNA连接酶的参与

 

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降钙素是一种多肽类激素,临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低,半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素,从预期新型降钙素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了两条72个碱基的DNA单链,两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平,获得双链DNA,过程如下图:

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获得的双链DNA经EcoRⅠ(识别序列和切割位点—G↓AATTC—)和BamHⅠ(识别序列和切割位点—G↓GATCC—)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中。下列有关分析不正确的是(  )

A.Klenow酶是一种DNA聚合酶

B.合成的双链DNA有72个碱基对

C.EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是保证目的基因和运载体的定向连接

D.筛选重组质粒需要大肠杆菌质粒中含有标记基因

 

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金茶花是中国特有的观赏品种,但易得枯萎病。科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因,通过下图所示的方法培育出了抗枯萎病的金茶花新品种。相关叙述正确的是(  )

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A.图中①②在基因工程中依次叫做基因表达载体、目的基因

B.形成③的操作中使用的酶有限制酶、DNA聚合酶和DNA连接酶

C.由④培育至⑤过程中,依次经历了脱分化、再分化过程

D.在⑤幼苗中检测到抗枯萎病基因标志着成功培育新品种

 

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生物分子间特异性结合的性质广泛用于生命科学研究。以下实例为体外处理“蛋白质-DNA复合体”获得DNA片段信息的过程图。

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据图回答:

(1)过程①酶作用的部位是          键。此过程只发生在非结合区DNA,过程②酶作用的部位是        键。

(2)①、②两过程利用了酶的        特性。

(3)若将得到的DNA片段用于构建重组质粒,需要将过程③的测序结果与         酶的识别序列进行比对,以确定选用何种酶。

(4)如果复合体中的蛋白质为RNA聚合酶,则其识别、结合的DNA序列区为基因的       

(5)以下研究利用了生物分子间特异性结合性质的有    (多选)。

A.分离得到核糖体,用蛋白酶酶解后提取rRNA

B.用无水乙醇处理菠菜叶片,提取叶绿体基粒膜上的光合色素

C.通过分子杂交手段,用荧光物质标记的目的基因进行染色体基因定位

D.将抑制成熟基因导入番茄,其mRNA与催化成熟酶基因的mRNA互补结合,终止后者翻译,延迟果实成熟

 

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