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低温蛋白酶是海洋嗜冷细菌分泌的酶类,最适温度在20℃左右,作为洗衣粉添加剂可在较...

低温蛋白酶是海洋嗜冷细菌分泌的酶类最适温度在20左右作为洗衣粉添加剂可在较低的温度下达到理想的洗涤效果。下图为分离可分泌低温蛋白酶的某种嗜冷菌的操作步骤据图回答问题

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(1)分装前对培养基要进行        操作。为避免杂菌污染要及时进行               操作。

(2)将扩大培养后的深海微生物用        法接种到含酪蛋白的固体培养基表面在适宜条件下培养一段时间挑出形成透明圈的单一菌落即为初选出的嗜冷菌。从嗜冷菌分泌的蛋白质中分离出低温蛋白酶的最常用的方法是    

(3)为进一步检测分离出的低温蛋白酶的最适温度将该菌按上图所示分5组分别置于        中进行培养              组所对应的温度为最适温度。

(4)为提高酶的利用率可以采用    技术常用的方法有 ____________

 

(1)调pH 高压蒸汽灭菌 (2)稀释涂布平板(或平板划线) 电泳法(凝胶色谱法) (3)恒温箱 透明圈与菌落直径比值最大 (4)固定化酶 化学结合法和物理吸附法 【解析】(1)培养微生物的培养基需要适宜的pH,因此制备培养基时应在分装前调pH,然后进行高压蒸汽灭菌。 (2)微生物的接种方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法,分离低温蛋白酶可以采用电泳法(凝胶色谱法)。 (3)微生物的培养需要适宜的温度,因此应在恒温箱中进行培养。含有酪蛋白的培养基不透明,酪蛋白被低温蛋白酶分解后可形成透明圈,透明圈与菌落直径的比值反映了嗜冷菌分泌低温蛋白酶的能力。因此应挑选透明圈与菌落直径比值最大的菌体。 (4)采用固定化酶技术可以实现酶的回收利用,因此可以提高酶的利用率。固定化酶常用化学结合法和物理吸附法。  
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考点分析:
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胡萝卜素分为αβγ三类它广泛存在于植物各组织器官中请结合从胡萝卜中提取胡萝卜素的流程示意图回答下面的问题

胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素

(1)胡萝卜素易溶于        对提取胡萝卜素的溶剂的要求有三点一要具有较    (选填“高”或“低”)的沸点二要能够充分溶解胡萝卜素三要           

(2)流程中对胡萝卜粉碎的意义是_______________          。干燥的意义是                       

(3)如图1是某同学设计的纸层析法鉴定胡萝卜素粗品的实验装置图2是胡萝卜素层析结果示意图。请结合图解回答

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①图1装置的一个明显错误是 ________________________________________

在实验时一位同学把样品原点浸入到了溶剂内结果他没有得到图2所示的结果原因是                     

②在滤纸上点样时要求用最细的注射器点样并要在每次点样后用吹风机吹干其目的是                        

③点样时标准样品应点在图2中的      处。

 

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.苯胺是致癌物质土壤中有分解苯胺的异养型细菌下表是筛选分解苯胺的异养型细菌的培养基配方。

KH2PO4

1.4 g

Na2HPO4

2.1 g

MgSO4·7H2O

0.2 g

FeCl3

0.1 g

X

1 g

维生素

微量

琼脂

15 g

将上述物质溶解后用蒸馏水定容到1 000 mL

(1)此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外还能提供________________

          该培养基从作用看属于        

(2)下图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图。则获得图A效果的接种方法是 __________________________________________________

_________________________________________________________________

B效果的接种方法是 ________________________________________________

_________________________________________________________________

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.根据植物组织培养和生物有效成分的提取的知识回答下列问题

(1)菊花的组织培养常用的培养基是     原理是     

(2)从茶籽中提取茶油最好采用     工业上提取胡萝卜素一般采用萃取法鉴定该色素的方法是    法。

 

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微生物强化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油增大石油的乳化度降低石油黏度的原理通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作。请回答下列问题

(1)土壤是微生物的大本营该类微生物应取自____________________________                的土壤。

(2)为筛选和纯化该类微生物从功能上分应选用     培养基。常用的接种方法有__________________________________________________________

                  

(3)接种后应密封培养的原因是                 培养一段时间后在培养基上形成降油圈此时选取_____________________________

就可获得高效菌株。

(4)扩大培养过程中需要对微生物进行计数。取0.2 mL样品用固体培养基对其培养最后统计三个平板菌落数分别是200180220。则样品中微生物的数量为    /mL。该统计结果    (填“低于”或“高于”)实际值。

 

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为验证某种中药牙膏是否像其广告宣传的一样具有较强的抑菌功效某生物兴趣小组的同学设计了如下实验(符合无菌操作要求)。请分析下述实验过程并回答下列问题

用无菌水漱口向漱口液中加入适量的该中药牙膏。

配制牛肉膏蛋白胨固体培养基。

将上述样品接种到培养基上在适宜条件下进行培养。

一段时间后对培养结果进行观察并进行菌落计数。

(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是计算、称量、溶化、灭菌、    

(2)本实验样品接种时最好采用               法。

培养一段时间后培养基表面长出菌落每一个标准菌落来源于样品中的    

(3)本实验设计中的一个明显错误是               请加以改正 ______________________________________________________________

_________________________________________________________________

(4)证明所用培养基已经彻底灭菌的方法是 ______________________________

_________________________________________________________________

 

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常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖自然界中一些酵母菌能分解木糖产生酒精但对酒精的耐受能力较差。下面是利用木糖发酵产生酒精的酿酒酵母的培育过程请分析回答下列问题。

(1)将自然界中采集到的葡萄带回实验室      将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中瓶中的液体经适当稀释后      (方法)接种于固体培养基上在适宜的条件下培养获得各种菌落。

(2)将培养基上的酵母菌菌株转接到以木糖为唯一碳源的培养基中无氧条件下培养一周后有些酵母菌死亡说明这些酵母菌           。从存活的酵母菌中提取DNA,并用PCR技术大量扩增目的基因。

(3)将目的基因连接到一种穿梭质粒(可以在大肠杆菌中复制和在酿酒酵母中表达的质粒)上。该质粒具有两种标记基因即氨苄青霉素抗性基因和尿嘧啶合成酶基因。大肠杆菌被该质粒转化后应接种于含    的培养基上进行筛选。将质粒导入酵母菌时由于氨苄青霉素不能抑制酵母菌繁殖应选择缺乏      能力的酿酒酵母作为受体菌。

(4)对转基因酿酒酵母发酵能力进行测试结果如图所示

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据图分析将转基因酿酒酵母接种在以      为碳源的培养基中进行发酵能力测试最初培养基中的    糖被快速消耗随着发酵继续进行转基因酿酒酵母能够              说明所需菌株培育成功。

 

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