低温蛋白酶是海洋嗜冷细菌分泌的酶类,最适温度在20℃左右,作为洗衣粉添加剂可在较低的温度下达到理想的洗涤效果。下图为分离可分泌低温蛋白酶的某种嗜冷菌的操作步骤,据图回答问题:
(1)分装前,对培养基要进行 操作。为避免杂菌污染,要及时进行 操作。
(2)将扩大培养后的深海微生物用 法接种到含酪蛋白的固体培养基表面,在适宜条件下培养一段时间,挑出形成透明圈的单一菌落,即为初选出的嗜冷菌。从嗜冷菌分泌的蛋白质中分离出低温蛋白酶的最常用的方法是 。
(3)为进一步检测分离出的低温蛋白酶的最适温度,将该菌按上图所示分5组分别置于 中进行培养, 组所对应的温度为最适温度。
(4)为提高酶的利用率,可以采用 技术,常用的方法有 ____________。
胡萝卜素分为α、β、γ三类,它广泛存在于植物各组织器官中,请结合从胡萝卜中提取胡萝卜素的流程示意图回答下面的问题:
胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素
(1)胡萝卜素易溶于 ,对提取胡萝卜素的溶剂的要求有三点:一要具有较 (选填“高”或“低”)的沸点,二要能够充分溶解胡萝卜素,三要 。
(2)流程中对胡萝卜粉碎的意义是_______________ 。干燥的意义是 。
(3)如图1是某同学设计的纸层析法鉴定胡萝卜素粗品的实验装置图,图2是胡萝卜素层析结果示意图。请结合图解回答:
①图1装置的一个明显错误是 ________________________________________;
在实验时,一位同学把样品原点浸入到了溶剂内,结果他没有得到图2所示的结果,原因是 。
②在滤纸上点样时要求用最细的注射器点样,并要在每次点样后用吹风机吹干,其目的是 。
③点样时,标准样品应点在图2中的 处。
Ⅰ.苯胺是致癌物质,土壤中有分解苯胺的异养型细菌,下表是筛选分解苯胺的异养型细菌的培养基配方。
KH2PO4 | 1.4 g |
Na2HPO4 | 2.1 g |
MgSO4·7H2O | 0.2 g |
FeCl3 | 0.1 g |
X | 1 g |
维生素 | 微量 |
琼脂 | 15 g |
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL | |
(1)此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外,还能提供________________
和 ,该培养基从作用看属于 。
(2)下图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图。则获得图A效果的接种方法是 __________________________________________________
_________________________________________________________________ ,
图B效果的接种方法是 ________________________________________________
_________________________________________________________________ 。
Ⅱ.根据植物组织培养和生物有效成分的提取的知识回答下列问题:
(1)菊花的组织培养常用的培养基是 ,原理是 。
(2)从茶籽中提取茶油最好采用 法,工业上提取胡萝卜素一般采用萃取法,鉴定该色素的方法是 法。
微生物强化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油,增大石油的乳化度,降低石油黏度的原理,通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作。请回答下列问题:
(1)土壤是微生物的大本营,该类微生物应取自____________________________ 的土壤。
(2)为筛选和纯化该类微生物,从功能上分,应选用 培养基。常用的接种方法有__________________________________________________________
和 。
(3)接种后,应密封培养的原因是 ,培养一段时间后在培养基上形成降油圈,此时选取_____________________________
就可获得高效菌株。
(4)扩大培养过程中需要对微生物进行计数。取0.2 mL样品,用固体培养基对其培养,最后统计三个平板,菌落数分别是200、180、220。则样品中微生物的数量为 个/mL。该统计结果 (填“低于”或“高于”)实际值。
为验证某种中药牙膏是否像其广告宣传的一样具有较强的抑菌功效,某生物兴趣小组的同学设计了如下实验(符合无菌操作要求)。请分析下述实验过程并回答下列问题:
①用无菌水漱口,向漱口液中加入适量的该中药牙膏。
②配制牛肉膏蛋白胨固体培养基。
③将上述样品接种到培养基上,在适宜条件下进行培养。
④一段时间后,对培养结果进行观察并进行菌落计数。
(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是:计算、称量、溶化、灭菌、 。
(2)本实验样品接种时最好采用 法。
培养一段时间后,培养基表面长出菌落,每一个标准菌落来源于样品中的 。
(3)本实验设计中的一个明显错误是 ,请加以改正: ______________________________________________________________
_________________________________________________________________ 。
(4)证明所用培养基已经彻底灭菌的方法是 ______________________________
_________________________________________________________________ 。
常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖,自然界中一些酵母菌能分解木糖产生酒精,但对酒精的耐受能力较差。下面是利用木糖发酵产生酒精的酿酒酵母的培育过程,请分析回答下列问题。
(1)将自然界中采集到的葡萄带回实验室,用 将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,瓶中的液体经适当稀释后,用 (方法)接种于固体培养基上,在适宜的条件下培养,获得各种菌落。
(2)将培养基上的酵母菌菌株转接到以木糖为唯一碳源的培养基中,无氧条件下培养一周后,有些酵母菌死亡,说明这些酵母菌 。从存活的酵母菌中提取DNA,并用PCR技术大量扩增目的基因。
(3)将目的基因连接到一种穿梭质粒(可以在大肠杆菌中复制和在酿酒酵母中表达的质粒)上。该质粒具有两种标记基因,即氨苄青霉素抗性基因和尿嘧啶合成酶基因。大肠杆菌被该质粒转化后,应接种于含 的培养基上进行筛选。将质粒导入酵母菌时,由于氨苄青霉素不能抑制酵母菌繁殖,应选择缺乏 能力的酿酒酵母作为受体菌。
(4)对转基因酿酒酵母发酵能力进行测试,结果如图所示:
据图分析,将转基因酿酒酵母接种在以 为碳源的培养基中进行发酵能力测试,最初培养基中的 糖被快速消耗,随着发酵继续进行,转基因酿酒酵母能够 ,说明所需菌株培育成功。