烟草花叶病毒(TMV)是一种在烟草及蔬菜等经济作物中广泛传播的病毒，对农业生产造成很大的危害。研究者利用植物基因工程的方法将烟草花叶病毒外壳蛋白基因(CP基因)导入烟草并在转化的烟草植株中表达，使其获得对烟草花叶病毒的抗性。下图是转化烟草植株的培育流程，请回答：
(1)含有CP基因的cDNA文库是通过将TMV的RNA进行 获得的。在对cDNA进行PCR扩增时，设计的引物自身不能含有 序列。
(2)将CP基因导入土壤农杆菌质粒的 ，其原因是 __________________
_________________________________________________________________ 。
(3)含重组质粒的土壤农杆菌与烟草叶共培养过程中，对烟草叶的处理要求是 ________________________________________。
(4)用含重组质粒的土壤农杆菌感染烟草叶成功后，共培养形成愈伤组织时的培养条件是必须 。
(5)在诱导芽、根的培养基中需添加 才能进行筛选，并要注意在不同的培养阶段需调整 的比例。
根据相关知识，回答胡萝卜素提取和酶应用方面的问题：
(1)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和 ，以提高萃取效率；水蒸气蒸馏法 (填“适合”或“不适合”)胡萝卜素的提取，原因是 ___________________________________
__________________________________________________________________；
鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常可采用 法，并以_______ 样品作为对照。
(2)若要提高衣物上血渍的去除效果，可在洗衣粉中加入____________________
酶，因为该酶能将血红蛋白水解成可溶性的 或 ；若要提高衣物上油渍的去除效果，洗衣粉中可添加 酶；使用加酶洗衣粉时，水温过低或过高时洗涤效果不好的原因分别是 ________________
_________________________________________________________________。
低温蛋白酶是海洋嗜冷细菌分泌的酶类，最适温度在20℃左右，作为洗衣粉添加剂可在较低的温度下达到理想的洗涤效果。下图为分离可分泌低温蛋白酶的某种嗜冷菌的操作步骤，据图回答问题：
(1)分装前，对培养基要进行 操作。为避免杂菌污染，要及时进行 操作。
(2)将扩大培养后的深海微生物用 法接种到含酪蛋白的固体培养基表面，在适宜条件下培养一段时间，挑出形成透明圈的单一菌落，即为初选出的嗜冷菌。从嗜冷菌分泌的蛋白质中分离出低温蛋白酶的最常用的方法是 。
(3)为进一步检测分离出的低温蛋白酶的最适温度，将该菌按上图所示分5组分别置于 中进行培养， 组所对应的温度为最适温度。
(4)为提高酶的利用率，可以采用 技术，常用的方法有 ____________。
胡萝卜素分为α、β、γ三类，它广泛存在于植物各组织器官中，请结合从胡萝卜中提取胡萝卜素的流程示意图回答下面的问题：
胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素
(1)胡萝卜素易溶于 ，对提取胡萝卜素的溶剂的要求有三点：一要具有较 (选填“高”或“低”)的沸点，二要能够充分溶解胡萝卜素，三要 。
(2)流程中对胡萝卜粉碎的意义是_______________ 。干燥的意义是 。
(3)如图1是某同学设计的纸层析法鉴定胡萝卜素粗品的实验装置图，图2是胡萝卜素层析结果示意图。请结合图解回答：
①图1装置的一个明显错误是 ________________________________________；
在实验时，一位同学把样品原点浸入到了溶剂内，结果他没有得到图2所示的结果，原因是 。
②在滤纸上点样时要求用最细的注射器点样，并要在每次点样后用吹风机吹干，其目的是 。
③点样时，标准样品应点在图2中的 处。
Ⅰ.苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，下表是筛选分解苯胺的异养型细菌的培养基配方。
KH2PO4 | 1.4 g |
Na2HPO4 | 2.1 g |
MgSO4·7H2O | 0.2 g |
FeCl3 | 0.1 g |
X | 1 g |
维生素 | 微量 |
琼脂 | 15 g |
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL | |
(1)此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供________________
和 ，该培养基从作用看属于 。
(2)下图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图。则获得图A效果的接种方法是 __________________________________________________
_________________________________________________________________ ，
图B效果的接种方法是 ________________________________________________
_________________________________________________________________ 。
Ⅱ.根据植物组织培养和生物有效成分的提取的知识回答下列问题：
(1)菊花的组织培养常用的培养基是 ，原理是 。
(2)从茶籽中提取茶油最好采用 法，工业上提取胡萝卜素一般采用萃取法，鉴定该色素的方法是 法。
微生物强化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油黏度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作。请回答下列问题：
(1)土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自____________________________ 的土壤。
(2)为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用 培养基。常用的接种方法有__________________________________________________________
和 。
(3)接种后，应密封培养的原因是 ，培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取_____________________________
就可获得高效菌株。
(4)扩大培养过程中需要对微生物进行计数。取0.2 mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是200、180、220。则样品中微生物的数量为 个/mL。该统计结果 (填“低于”或“高于”)实际值。
