由李建远教授率领的科研团队,在山东烟台毓璜顶医院成功克隆出5枚符合国际公认技术鉴定指标的人类囊胚。请回答下列问题:
(1)在卵子去核的过程中,李建远教授采用三维立体偏震光纺锤体成像系统,对核DNA精确定位后,再用微激光主要对卵子的第一屏障打孔,才能精确剔除卵子细胞核。这一屏障是指 ( )
A.卵细胞膜 B.透明带 C.核膜
(2)在培养皮肤纤维细胞和淋巴细胞时,需要用胰蛋白酶等处理,目的是 。培养过程中除了保证无菌、无毒的环境外,为了防止污染通常还要在细胞培养液中添加一定量的 。
(3)通过克隆胚胎进而用其衍生而来的器官取代患者病变的器官,就会避免免疫排斥反应的发生,根本原因是 。
(4)获得目的基因后可采用 技术进行扩增。大部分物种的基因能拼接在一起,是因为 。检测目的基因是否成功导入植物细胞,可采用的生物技术是 。
从世界上第一位“试管婴儿”诞生,至今全球试管婴儿数量已达到400万。从克隆羊“多利”诞生,至今已成功克隆了多种动物。请分析回答试管婴儿与克隆技术的有关问题:
(1)试管婴儿和克隆动物的培育过程中均会用到的生物技术有 、 。
(2)试管婴儿和克隆动物的生殖方式分别属于_____________________________
和 。
(3)培育试管婴儿时,可通过给母体注射 增加排卵数量,从父亲体内获得的精子需要进行 处理,才能完成受精作用。
(4)克隆动物时,将甲个体的细胞核移入乙个体去核的卵母细胞中,由重组细胞培育成个体丙,则个体丙的基因来源于 __________________________________
_________________________________________________________________ 。
(5)请列举一例克隆技术在医疗方面的应用: 。
胚胎移植的基本程序如下图(以牛胚胎移植为例),请据图回答问题:
(1)对供体母牛、供体公牛的要求是 。
(2)同期发情处理的方法是 ,冲卵中的“卵”是指 。
(3)受精有关过程有:①第一次卵裂开始,②释放第二极体,③顶体反应,④穿越透明带,⑤雌、雄原核的形成,⑥核膜消失,雌、雄原核融合。其正确的顺序为 (填序号),受精的标志是 。
(4)若供体母牛具有许多优良性状,可利用体细胞克隆技术加速遗传改良进程,请回答下列有关问题:
①目前核移植技术中普遍使用的去核方法是 。
②用于核移植的体细胞一般选用 代以内的细胞,原因是 。
下图为单克隆抗体制备流程示意图。
(1)单克隆抗体制备技术的基础是 。
(2)细胞融合是随机的过程,在HAT培养基上培养,目的是 。在细胞培养过程中,培养液中需要添加无机盐,但要注意无机盐的 ,以保证生命活动的正常进行。
(3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞,要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7~10个细胞/mL,每孔滴入0.1 mL细胞稀释液,其目的是 _____________
_________________________________________________________________ 。
(4)若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞,放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是 _______________________________________________
_________________________________________________________________ 。
某竹芋科植物果实中含有一种甜蛋白,其甜度为蔗糖的三千倍,是理想的甜味剂。某研究小组试图把甜蛋白基因(目的基因)导入黄瓜中,以改良这种黄瓜的品质。获得转基因黄瓜植株的流程图如下,请回答:
(1)通过步骤①和②可人工合成目的基因,在步骤②中先以mRNA为模板在______
酶的作用下合成互补DNA,然后通过一系列实验从中筛选出 基因。此外,还可以根据甜蛋白的氨基酸序列推测出 序列,再用 合成。
(2)通过 技术,可以获得大量目的基因。利用该技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成 。
(3)导入了目的基因的叶片组织细胞经过步骤③ 和④_______
后形成了完整的植株,说明 。
(4)可以通过 技术检测黄瓜植株中是否含有甜蛋白。
烟草花叶病毒(TMV)是一种在烟草及蔬菜等经济作物中广泛传播的病毒,对农业生产造成很大的危害。研究者利用植物基因工程的方法将烟草花叶病毒外壳蛋白基因(CP基因)导入烟草并在转化的烟草植株中表达,使其获得对烟草花叶病毒的抗性。下图是转化烟草植株的培育流程,请回答:
(1)含有CP基因的cDNA文库是通过将TMV的RNA进行 获得的。在对cDNA进行PCR扩增时,设计的引物自身不能含有 序列。
(2)将CP基因导入土壤农杆菌质粒的 ,其原因是 __________________
_________________________________________________________________ 。
(3)含重组质粒的土壤农杆菌与烟草叶共培养过程中,对烟草叶的处理要求是 ________________________________________。
(4)用含重组质粒的土壤农杆菌感染烟草叶成功后,共培养形成愈伤组织时的培养条件是必须 。
(5)在诱导芽、根的培养基中需添加 才能进行筛选,并要注意在不同的培养阶段需调整 的比例。