Question

降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用游离的脱氧核苷酸和Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图。在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。请据图回答：

（1）Klenow酶是一种                   酶，合成的双链DNA有               个碱基对。

（2）获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点-G^↓AATTC-）和BamHⅠ（识别序列和切割位点-G^↓GATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。

①大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它_                               。

②设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是__                                    。

③要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有               。

（3）上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是                    。

Answer

（1）DNA聚合 126

（2）①繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少

②保证目的基因和载体定向连接（或防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接）

③标记基因

（3）蛋白质工程。

【解析】

试题分析：（1）Klenow酶催化了原料按照模板链通过碱基互补配对相连，故属于DNA聚合酶，合成双链后碱基对数为72×2-18=128。（2）①大肠杆菌具有繁殖快、代谢旺盛等特点；②若只用一种限制酶处理，则目的基因和载体的末端可以任意连接成环，用两种限制酶可保证目的基因和载体定向连接；③标记基因用于重组质粒的鉴定和选择。（3）由于该新型降钙素是原来没有的新蛋白质，所以运用了蛋白质工程。

考点：本题考查基因工程的应用等相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。