Question

（16分）草甘膦是一种广谱除草剂，其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成，最终导致植物死亡。但是，它的使用有时也会影响到植物的正常生长。目前，已发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因，若将该基因转入植物细胞内，从而获得的转基因植物就能耐受高浓度的草甘膦。

取6株植物，其中，植物A和D对草甘膦敏感，B和E对草甘膦天然具有抗性，C和F则经过了转基因处理，但是是否成功还未知。图1为4种限制酶的识别序列和酶切位点，图2为含有目的基因的DNA片段及其具有的限制酶切点。据图回答下列问题：

（1）若A-C浇清水，D-F浇的水中含有草甘膦，上述植物中，肯定能健康成长的是________。

（2）若要从大肠杆菌中筛选出含EPSPS基因的突变菌株甲，在大肠杆菌培养基中还必须加入____________。

（3）一个完整的基因表达载体除了具备复制原点、启动子和终止子外，还应包括______和________。

（4）若需利用酶切法获得目的基因，最应选择的限制酶是________和________。

（5）通常用____________法将EPSPS基因导入植物体内。假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中，但植物F仍没有表现出抗性，分析可能的原因____________。

Answer

（1）ABCE (2)草甘膦 （3）标记基因 目的基因 （4） MspⅠ SmaⅠ

（5）农杆菌转化法 目的基因没有成功表达或表达的产物失活

【解析】

试题分析：

（1）题干中植物A和D对草甘膦敏感，B和E对草甘膦天然具有抗性，C和F则经过了转基因处理，是否成功还未知，所以A-C浇清水，都能健康成长。D-F浇的水中含有草甘膦，D肯定不能健康成长，E肯定能健康成长，F未知。因此肯定能健康成长的是ABCE。

（2）要从大肠杆菌中筛选出含EPSPS基因的突变菌株，则必须要用含草甘膦的选择培养基培养大肠杆菌。

（3）一个完整的基因表达载体由复制原点、启动子、终止子、标记基因 、目的基因组成。

（4）对照图1和2所示，酶BamHⅠ、MboⅠ能破坏EPSPS基因，不能使用，应用MspⅠ与SmaⅠ同时进行酶切。

（5）将EPSPS基因导入植物体内通常用农杆菌转化法。如果EPSPS基因已被成功转移到植物F中，但目的基因没有成功表达或表达的产物失活，植物F仍没有表现出抗性。

考点：本题考查基因工程的知识。意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能用文字、图表以及数学方式等多种表达形式准确地描述生物学方面的内容。能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力。