Question

尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌的分解作用，才能被植物吸收利用．某同学要分离出土壤中能分解尿素的细菌，并尝试进行计数，培养基配方如下：

K₂HPO₄    NaCl    H₂O    葡萄糖    尿素    酚红    琼脂

0.12g    0.12g    15mL    0.025g    2.0g    0.25mg    0.5g

（1）分解尿素的细菌都能合成 脲酶 ，该种细菌在生态平衡中起到什么作用？ 参与了氮循环（或维持氮平衡） ．写出细菌分解尿素的方程式 ．

（2）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？ 不能 （能/不能），原因是 琼脂是未被纯化的混合物，内含一定的含氮化合物，尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为氮源的微生物 ．

（3）分离得到分解尿素的细菌后，如果要扩大培养，则应选择 培养基进行培养．培养一段时间后，使用 对微生物细胞进行计数．计数过程中，下列哪种行为会影响计数的准确性 A

A．计数时直接从静置培养的试管底部取培养液进行计数

B．如果方格内微生物细胞数量多于300 个，培养液先稀释后再计数

C．如果微生物细胞有粘连，要数出团块中的每一个细胞

D．压在方格线上的细胞只计左线和上线上的细胞数

（4）为了提高尿素肥效，可以将分解尿素的酶和尿素混合，制成“加酶尿素”．为了提高“加酶尿素”中酶的利用率，可采用 固定化酶 技术．

Answer

（1）脲酶 参与了氮循环（或维持氮平衡）

（2）不能 琼脂是未被纯化的混合物，内含一定的含氮化合物，尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为氮源的微生物

（3）液体 血球计数板 A

（4）固定化酶

【解析】

试题分析：分解尿素的细菌都能合成脲酶，因此可以选用以尿素为唯一氮源的培养基来分离细菌，并且本实验用琼脂糖来代替琼脂作为微生物培养基的固化剂，这样就尽可能使培养基中只含有尿素这一种含氮化合物，有利于对这种细菌的筛选．

【解析】
（1）含有脲酶的细菌通过降解尿素为氨作为其生长的氮源，从而也起到维持生物圈氮元素的平衡作用．

（2）从培养基的成分看因为含有琼脂，所以不能分离出分解尿素的细菌，因为琼脂是一种未被纯化的混合物，内含一定量的含氮化合物，不利于以尿素为氮源的细菌的筛选．

（3）扩大培养需要使用液体培养基，对微生物或者酵母菌等进行计数时常用血细胞计数板进行计数，再通过计数得到比较准确的数量．计数过程需要注意操作规范，如A选项所述的操作会影响计数的准确性，应该把试管上下倒转数次，使细菌分布均匀．

（4）固定化酶技术可以提高酶的利用率．