Question

（11分）利用紫外线诱变选育高产β-胡萝卜素的三孢布拉霉负菌（单细胞真菌），未突变菌不能在含有浓度为10^-5M的β-紫罗酮的培养基上生长。菌体随β━胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色。图甲为选育及提取获得β-胡萝卜素流程。

（1）三孢布拉霉负菌与细菌共同具有的细胞器是________。从真菌细胞中提取酶时，常常采用_______             法将相对分子质量不同的酶进行分离。

（2）培养基中的葡萄糖为菌体生长提供_________________；为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加_____________           。

（3）进行③过程时，应选取________色的菌落接种至液体培养基。为筛选纯化β-胡萝卜素产量高的菌种，采取重复________（填图甲中数字）过程。

（4）固体平板培养基经过程②接种培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是____________；只有少数菌能生长形成菌落的根本原因是_____________________                   。

（5）过程⑥是______________，用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品，结果发现颜色较浅，导致该现象的原因可能是萃取时，萃取剂使用量_________，提取的色素少。

（6）选取胡萝卜韧皮部细胞进行植物组织培养时，其操作步骤是①制备MS培养基；②_            ；③接种；④培养；⑤移栽；⑥栽培。

Answer

(11分，每空1分)

（1） 核糖体 凝胶色谱

（2） 碳源（答碳源和能源也给分） 10 -5M的β━紫罗酮（答全给分）

（3） 橙红 ③④

（4） 稀释涂布平板法 基因突变频率低和不定向性（答1点也给分）

（5） 浓缩 过少

（6）外植体消毒

【解析】

试题分析：（1）三孢布拉霉负菌为单细胞真菌，由真核细胞构成，细菌为原核生物，由原核细胞构成，原核细胞与真核细胞共同具有的细胞器是核糖体。从真菌细胞中提取的酶的化学本质是蛋白质，将相对分子质量不同的蛋白质进行分离时，常常采用凝胶色谱法。

（2）培养基中的葡萄糖为菌体生长提供碳源。依题意，未突变菌不能在含有浓度为10-5M的β-紫罗酮的培养基上生长，因此为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加10 -5M的β━紫罗酮。

（3）因菌体随β━胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色，为选育高产β-胡萝卜素的三孢布拉霉负菌，进行③过程时，应选取橙红色的菌落接种至液体培养基，并且采取重复③④的过程。

（4）结合图甲和图乙可知，平板培养后，形成了多个菌落，因此为稀释涂布平板法。只有少数菌能生长形成菌落的根本原因是基因突变的频率低，具有不定向性。

（5）提取胡罗卜素的流程是：……萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素，因此过程⑥是浓缩。在萃取这一环节，若萃取剂使用量过少，溶解在萃取液中的β━胡萝卜素的量就会减少，即提取的色素少，就会导致用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品时，呈现的颜色较浅。

（6）植物组织培养的实验操作流程是：①制备MS培养基→②外植体消毒→③接种→④培养→⑤移栽→⑥栽培。

考点：本题考查微生物的培养与应用、胡罗卜素的提取、植物的组织培养技术、原核细胞与真核细胞的统一性、基因突变的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能从题图中提取有效信息并运用所学知识与观点，对实验现象和结果进行解释、分析和处理，做出合理的判断或得出正确结论的能力。