Question

（16分）传统药用植物栝楼的根、果、种子等均能入药，其合成的天花粉蛋白是中药天花粉的主要有效成分。现科研人员进行以下的研究，大致流程如下：

（1）接种在MS培养基中的栝楼种子，如先经加水浸没的萌发率为75%，不加水浸没的萌发率为2.5%，说明栝楼种子萌发需要          。

（2）在培育“无菌苗”过程中，使用的部分激素组合如表1（注：—表示未添加该种植物激素），除甲组仅有顶芽长成小苗外，所有的培养基上都有腋芽长出，可见诱导腋芽生长加入        是必需的。

（3）在诱导“愈伤组织”的MS培养基中，使用了以下一些激素组合（如表2），以上培养基均能诱导叶盘缓慢长出黄绿色的愈伤组织，其中组B2和组B3诱导产生的愈伤组织在培养30天后分化出小芽点，并迅速长大成无根苗，两组的分化率分别为25.0%和14.3%。可见0.2mg/LNAA与激动素(6-BA等)配合可诱导栝楼叶片          长出愈伤组织，但不利于诱导愈伤组织           。

（4）科研人员从组培、栽培、野生栝楼的根中提取了总蛋白，并进行了分离与纯化及精细分析，不同来源的根的蛋白质带型差异较大。鉴定蛋白质纯度常用             方法。分析结果显示，栽培（移栽成活1个月的组培苗）和野生栝楼的根都检测到了与对照天花粉蛋白相对应的         ，说明            基因在两种来源的栝楼根细胞中的表达情况相同；而组培根中未观察到任何明显的杂交条带，说明该基因的表达可能还需要              。

Answer

（1）充足的水分（水分、水）

（2）6—BA或NAA或6—BA和NAA（植物激素）

（3）脱分化 再分化

（4）凝胶电泳（SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳） 特异性蛋白质带型或特异性条带 天花粉蛋白 一定的外界（环境）诱导条件（受一定的外界条件影响，受环境因素影响，）

【解析】

试题分析：

（1）从题意中可以看出，种子浸泡后萌发率提高，说明种子萌发过程中需要水分。

（2）比较表格中信息和实验结果可以推测：只加入6—BA或NAA，或者6—BA和NAA二者均加入，都可以促进腋芽的生长。

（3）A1、B1和C1组中都是0.2mg/LNAA与激动素(6-BA等)配合，根据实验结果，只出现愈伤组织，说明0.2mg/LNAA与激动素(6-BA等)配合可以促进脱分化过程，由于没有长成幼苗，说明不利于再分化过程。

（4）鉴定和分离蛋白质纯度可以采用凝胶电泳法进行分离；如果与对照组的特异性条带相对应，说明这两种细胞中都有天花粉蛋白，同时说明天花粉蛋白基因在这两种细胞中都得到了表达；组培根中没有观察到相应的杂交条带，说明天花粉蛋白基因的表达与外界环境因素有关。

考点：本题考查植物组织培养、蛋白质的提取和分离的有关知识，意在考查考生识图能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；能从课外材料中获取相关的生物学信息，并能运用这些信息，结合所学知识解决相关的生物学问题。