Question

下图中甲是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线，表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，乙中箭头表示相关限制酶的酶切位点。

（1）图中将人乳铁蛋白基因插入质粒，可以只用EcoR I同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因，也可以使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因，后一个方法的优点在于可以防止                               。

（2）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入______酶。重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了                 。

（3）从分子水平简述雌性转基因牛分泌人乳铁蛋白的过程是             。

（4）该雌性转基因牛经与普通雄性个体交配所产的雌性后代是否也能分泌含人乳铁蛋白的乳汁？为什么？                                                                。

Answer

（1）产生质粒和目的基因自身连接产物

（2）DNA连接酶 鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

（3）DNA（人乳铁蛋白基因）转录成mRNA，mRNA翻译成蛋白质（人乳铁蛋白）

（4）不一定 因为该雌性转基因牛产生的卵细胞可能含人乳铁蛋白基因，也可能不含。

【解析】

试题分析：（1）只用EcoRI酶切割，质粒和目的基因两端的粘性末端相同，用DNA连接酶连接时，会产生质粒和目的基因自身连接物，而利用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶剪切时，质粒和目的基因两端的黏性末端不同，用DNA连接酶连接时，不会产生自身连接产物。

（2）为了获取重组质粒，可以将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶；质粒中的抗生素抗性基因常用作标记基因，其作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

（3）人乳铁蛋白是由乳铁蛋白基因控制合成的，即DNA（人乳铁蛋白基因）转录成mRNA，mRNA翻译成蛋白质（人乳铁蛋白）。

（4）该雌性转基因牛相当于杂合子，所以其产生的卵细胞可能含人乳铁蛋白基因，也可能不含，因此，该雌性转基因牛与普通雄性个体交配，所产的雌性后代不一定也能分泌含人乳铁蛋白的乳汁。

考点：本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。