Question

(12分) 利用转基因山羊乳腺反应器可生产人促红细胞生成素(EPO)，获得转基因山羊的过程如下图。请据图回答下列问题：

（1）在已知EPO基因的上游和下游碱基序列的前提下，过程①获取目的基因的方法为           。

（2）在过程②中，应用           切割目的基因和质粒，使其具有相同的黏性末端。EPO基因表达载体上要具备          等调控元件，以便完成EPO基因的转录。

（3）在过程③中，用           法将EPO表达载体移入雄原核中。在过程⑤前，需对囊胚期的细胞进行鉴定：一是用           法鉴定EPO基因表达产物；二是用         法鉴定囊胚的性别，选用雌性胚胎。

（4）为获得更多转基因山羊，一方面可对供体母山羊注射           促进超数排卵。另一方面，可对早期胚胎进行分割移植，胚胎分割的关键是           。

Answer

（除注明外，每空1分，共12分）

（1）PCR扩增（2分） （2）同一种限制酶 启动子和终止子（2分）

（3）显微注射法 抗原-抗体杂交（2分） DNA分析（2分）

（4）促性腺激素 将内细胞团均分

【解析】

试题分析：（1）依题意，可以依据已知EPO基因的上游和下游碱基序列合成引物，进而利用PCR技术扩增目的基因。

（2）过程②为基因表达载体的构建。在构建基因表达载体时，应使用同一种限制酶切割目的基因和质粒，使其具有相同的黏性末端。启动子位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，终止子是转录终止的信号，所以EPO基因表达载体上要具备启动子和终止子等调控元件，以便完成EPO基因的转录。

（3）过程③是将目的基因导入动物细胞的过程，该过程常采用显微注射法。EPO基因表达产物的化学本质是蛋白质，鉴定目的基因是否翻译成蛋白质，用抗原-抗体杂交技术；囊胚期的滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，对胎儿的发育没有多大影响，而且与将来发育成胎儿各种组织的内细胞团都来自同一个受精卵，基因型是相同的，因此鉴定囊胚的性别，应取滋养层做DNA分析性别鉴定。

（4）做超数排卵处理，应对供体母山羊注射促性腺激素；对早期胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割。

考点：本题考查基因工程、胚胎移植、胚胎分割的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。