Question

(12 分)世界苦荞在中国，中国苦荞在凉山。 苦荞富含黄酮类化合物等营养物质，在降血糖、降血脂等方面功效显著。查尔酮合成酶（CHS）是黄酮类化合物合成的关键酶，下图为将修饰后的 CHS基因导入苦荞，培育高产黄酮苦荞品系示意图。

（1）过程①中能切开质粒的酶是__________。它能在质粒特定的部位切割的原因是____________________。

（2）图中常用的是__________培养基。接种前，用灭菌后未接种的培养基培养一段时间，观察是否形成菌落，目的是__________________________________________________。

（3）过程②、③分别是__________和__________。苦荞体细胞能培养成植株的根本原因是___________________。

（4）为探究激素对于过程诱导愈伤组织的影响，某研究小组在培养基中加入6-BA和2,4─D，灭

菌后分别接种，在适宜条件下培养一段时间后，统计愈伤组织的诱导率，实验结果如下表：

该实验的因变量是____________，诱导的最佳组合是_____________________________________。

（5）判断转基因苦荞培育是否成功，可比较转基因苦荞与普通苦荞的________________含量，也可测定细胞中CHS含量。用凝胶色谱法分离CHS时，CHS最先从色谱柱中洗脱出来，说明CHS相对分子质量较______________。

Answer

(12分，除标注外每空1分)

（1）限制性核酸内切酶 能识别特定的核苷酸序列并在特定的切点上切割 DNA 分子 (2 分)

（2）MS 判断培养基灭菌是否彻底

（3）脱(去)分化 再分化 植物细胞的全能性其细胞中含有发育成完整个体所必需的全部基因

（4）诱导率 0.1mg•L -1 6-BA 和 4mg•L-12,4-D

（5）黄酮类化合物 大

【解析】

试题分析：（1）质粒是环状的DNA，能将质粒切开的应是限制性核酸内切酶。它能在质粒特定的部位切割的是因为其能在识别特定的核苷酸序列并在特定的切点上切割 DNA 分子。

（2）植物培养基通常是MS固体培养基。接种前，用灭菌后未接种的培养基培养一段时间，观察是否形成菌落，目的是判断培养基灭菌是否彻底。如果有菌落形成说明灭菌不彻底。

（3）过程②是形成愈伤组织的脱分化，③由愈伤组织培养成幼苗的再分化过程。体细胞能培养成完整植株的根本原因是植物细胞的全能性，其细胞中含有发育成完整个体所必需的全部基因。

（4）由表可知该实验的自变量是浓度和激素种类，因变量是诱导率。最高的诱导率组合是最佳的诱导组合应是0.1mg•L -1 6-BA 和 4mg•L-12,4-D。

（5）高产的转基因苦荞培育成功后黄酮类化合物含量较高，故应比较转基因苦荞与普通苦荞的黄酮类化合物含量。因为查尔酮合成酶（CHS）是黄酮类化合物合成的关键酶，所以也可以测定查尔酮合成酶的含量。凝胶色谱法分离蛋白质时，最先洗脱出来的是分子质量大的，说明CHS相对分子质量较大。

考点：本题考查植物组织培养相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度和对数据分析能力。