Question

（21分）在雄性动物的睾丸内，视黄酸能在特定时期激活控制减数分裂的S基因的表达，最终启动精子发生过程中的减数分裂。为进一步研究视黄酸在体外诱导胚胎干细胞（ESC）分化成生殖细胞的过程中是否起作用，科学家用雄鸡的胚胎干细胞做了如下实验：

（1）步骤①中，用于PCR性别鉴定的CHD基因在W和Z两条染色体上都有，但长度不同，分别用CHD-W和CHD-Z表示。根据两个基因的碱基序列设计特定的          ，用              做模板。每个PCR循环可分为         三步。将PCR产物电泳后，出现        条带的为雄性。

（2）步骤②中，要用                   切割质粒和含有S基因的DNA片段，以构建含有S基因的              。将其导入受体细胞时常用             的方法。

（3）步骤③中，将转入S基因的ESC分成两组，分别在添加一定浓度的视黄酸的培养基和普通培养基中培养；同时将没有转入S基因的ESC也分成两组，分别在上述两种培养基中培养。一段时间后提取并测定细胞中S基因的RNA（SRNA）含量，得到下图所示的结果：

丙组和丁组比较说明                             。

乙组和丁组比较说明                             。

与乙、丙、丁三组相比，甲组的结果说明                        。

（4）精子是由睾丸中          细胞经减数分裂发育而来的。对该过程起调节作用的激素是由睾丸分泌的         ，若正常雄性动物体内该激素浓度偏高会抑制           和          的释放，该调节方式称为            。

Answer

（1）引物 鸡胚基因组DNA 变性（解链）、复性（退火）和延伸 一条 （每空1分，4分）

（2）相同的限制性内切酶 表达载体 显微注射法 （每空2分，6分）

（3）视黄酸能促进内源S基因的表达

外源导入的S基因过（大）量表达

视黄酸和外源S基因两种因素能共同促进ESC分化成生殖细胞（视黄酸和外源S基因两种因素共同促进ESC的减数分裂）（每空2分，6分）

（4）精原 雄激素 促性腺激素释放激素 促性腺激素 反馈调节

【解析】

试题分析：（1）根据两个基因的碱基序列设计特定的引物，用鸡胚基因组DNA做模板。每个PCR循环可分为变性（解链）、复性（退火）和延伸，将PCR产物电泳后，出现一条带的为雄性。

（2）步骤②中，要用相同的限制性内切酶切割质粒和含有S基因的DNA片段，以构建含有S基因的表达载体。将其导入受体细胞时常用显微注射法。

（3）由图可知，丙组和丁组比较说明视黄酸能促进内源S基因的表达，乙组和丁组比较说明外源导入的S基因过（大）量表达，与乙、丙、丁三组相比，甲组的结果说明视黄酸和外源S基因两种因素能共同促进ESC分化成生殖细胞。

（4）精子是由睾丸中精原细胞经减数分裂发育而来的。对该过程起调节作用的激素是由睾丸分泌的雄激素，若正常雄性动物体内该激素浓度偏高会抑制促性腺激素和促性腺激素释放激素，该调节方式称为反馈调节。

考点：本题主要考察生物技术的相关知识，意在考查考生对相关知识的理解，把握知识间内在联系的能力。