Question

微生物强化采油（MEOR）是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油粘度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作。请回答下列问题：

（1）土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自        的土壤。

（2）为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用              培养基。常用的接种方法           和               。

（3）接种后，应密封培养的原因是           ，培养一段时间后在培养基上形成       ，此时选取             就可获得高效菌株。

（4）扩大培养过程中需要对微生物进行          。取0.2mL样品，用          基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是200、180、220。则样品中微生物的数量为          个/mL。该统计结果        （低于、高于）实际值。

Answer

（1）长期被石油污染（含石油多的）

（2）选择 平板划线法 稀释涂布平板法

（3）该类微生物是厌氧型 降油圈 降油圈大的菌落

（4）计数 固体培养 1000 低于

【解析】

试题分析：（1）在长期被石油污染的土壤中生存的微生物，能降解石油，所以土壤取样时，应从含石油多的土壤中采集。

（2）从功能上分，应选用特定的选择培养基对该类微生物进行筛选和纯化；常用的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。

（3）该类微生物是厌氧型微生物，所以接种后应密封培养；培养一段时间后在培养基上可形成降油圈；降油圈越大，说明该处的微生物降解石油的能力越强，所以应选择降油圈大的菌落进行培养以获得高效菌株。

（4）扩大培养过程中需要对微生物进行计数；需用固体培养基对其培养，以便统计菌落数量；计算微生物的数量应取三个平板的平均值，所以样品中微生物的数量为(200＋180＋220)÷3÷0.2＝1000个/mL；因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，即该统计结果低于实际值。

考点：本题考查土壤中降解石油的微生物的分离与计数的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。