Question

（8分）国家饮用水标准规定，每升饮用水中大肠杆菌不超过3个。某小组欲通过实验来检测自来水中大肠杆菌的含量，已知大肠杆菌在伊红—美蓝培养基培养，大肠杆菌菌落呈深紫色。请根据下列有关实验步骤回答问题。

(1) 配制培养基：配制伊红—美蓝培养基时，除蛋白胨、乳糖、伊红、美蓝等原料外，还需要水、无机盐和________。在这些成分中，能为大肠杆菌提供氮源的是________。搅拌加热至完全溶解后调节________，分装到锥形瓶。

(2) 倒平板：配制好的培养基用____________法灭菌后，待培养基冷却到50℃左右倒平板。平板冷凝后应将平板______     __放置，以防止皿盖上的水珠落入培养基。

(3) 接种：在右图的系列稀释操作中(10¹、10²、10³表示稀释倍数)，依次将1 mL液体移入下一个盛有________mL蒸馏水的试管中。过程a所用的接种方法为                  。

(4) 观察与计数：通过一段时间的培养，观察统计培养皿表面深紫色菌落的数目，结果如图所示，则自来水样本中大肠杆菌超标                  万倍

Answer

（1）琼脂 蛋白胨 PH （2）高压蒸汽灭菌 倒过来（倒置）

（3）9 （稀释）涂布（抹）平板法 （4）1000

【解析】 ⑴伊红-美蓝培养基属于鉴别培养基，是固体培养基，所以培养基中需添加凝固剂琼脂；另外培养基的营养成分一般含有水、碳源、氮源和无机盐，此培养成分中蛋白胨能提供氮源和碳源，乳糖提供碳源；搅拌加热后先调节PH值后灭菌。

⑵培养基一般采用高压蒸汽灭菌的方式灭菌；平板冷凝后应将平板倒过来放置，以防止培养基被皿盖上落入的水珠污染。

⑶根据稀释倍数，应依次将1 mL液体移入下一个盛有9mL蒸馏水的试管中；过程a所用的接种方法为（稀释）涂布（抹）平板法。

⑷国家饮用水标准规定，每升饮用水中大肠杆菌不超过3个，图中数据稀释1000倍后取0.1mL稀释液可观察到3个紫色菌落，那么每升水中应有30000000个，则自来水样本中大肠杆菌超标1000万倍。