(10分)大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列位于该质粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和X- gal时,X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶,培养基中的X-gal不会被水解成蓝色,大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。右图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。据图回答下列问题:
(1)作为受体大肠杆菌应___________(2分)以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。取用氯化钙溶液处理(增加其细胞壁的通透性)过的受体大肠杆菌,置于试管Ⅱ中,并加入__________________。(2分)
(2)图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入____________________(2分)等物质,用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。
(3)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养,以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒,请预测菌落的颜色,并分析结果(4分)
①______________________________________________________________________。
②___________________________________________________ _____________。
(10分)下图是制备分泌抗X抗体的过程,根据图解回答问题:
(1)给小鼠注射抗原的目的是 。
(2)在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有
和 的特性。
(3)由图中可看出,单克隆抗体制备过程运用了 和 的动物细胞工程技术手段,前者常用的诱导剂与植物原生质体融合不同的是 。
(4)动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等,与植物细胞培养基有所不同的是,还含有 。
(5)在动物细胞融合过程中,需要将所选取的组织细胞离散开,以利于细胞融合,可用 处理离体组织细胞使之分散开。
(6)图中有两次筛选过程,其中步骤④的目的是筛选出 ,步骤⑤⑥的目的是筛选出 。
(12分)下图所示胡萝卜的韧皮部细胞通过无菌操作,接入试管后,在一定的条件下,形成试管苗的培育过程,请据图回答下列问题:
(1)要促进细胞分裂生长,培养基中应有营养物质和激素。激素主要为_________和_______两类植物激素。
(2)此过程依据的原理是_____________,应用的技术是_____________,繁殖方式为__________
(3)A和B阶段主要进行的分裂方式是_______,B阶段除了细胞分裂外,还进行细胞________等。
(4)此过程要无菌操作,主要是指对______进行灭菌消毒,B阶段需要光照,原因是_____________。
(5)试管苗的根细胞没有叶绿素,而叶的叶肉细胞具有叶绿素,这是基因________的结果。
(6)愈伤组织的特点为____________________________________。(2分)
(10分)人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA 基因母羊的羊乳中获得。流程如下:
(1)htPA 基因与载体用_______________________切割后,通过___________连接,以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA,可采用_________________________技术。
(2)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊注射促性腺激素,使其_______________。采集的精子需要经过__________________,才具备受精能力。
(3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是_________________。为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行___________________。利用___________和胚胎移植技术可获得多个转基因个体,这体现了早期胚胎细胞的__________________。
(4)若在转ht-PA基因母羊的羊乳中检测到_________________________,说明目的基因成功表达。
(8分)植物甲具有极强的耐旱性,其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因,并将其转移到耐旱性低的植物乙中,有可能提高后者的耐旱性。 回答下列问题:
(1)理论上,基因组文库含有生物的__________基因;而cDNA 文库中含有生物的___________基因。
(2)若要从植物甲中获得耐旱基因,可首先建立该植物的基因组文库,再从中_________出所需的耐旱基因。
(3)将耐旱基因导入农杆菌,并通过农杆菌转化法将其导入植物____(“甲”或“乙”)的体细胞中,经过一系列的过程得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达,应检测此再生植株中该基因的__________,如果检测结果呈阳性,再在田间试验中检测植株的____________是否得到提高。
(4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交,子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为 3∶1 时,则可推测该耐旱基因整合到了______________(填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”)。(2分)
下列能正确表示高等动物胚胎发育顺序的是
A、受精卵→囊胚→原肠胚→幼体
B、卵→卵裂→原肠胚→幼体
C、受精卵→囊胚→原肠胚→幼体
D、受精卵→桑椹胚→囊胚→原肠胚→幼体