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(10分)大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列位于该质粒的lacZ基因...

(10分)大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列位于该质粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和X- gal时,X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶,培养基中的X-gal不会被水解成蓝色,大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。据图回答下列问题:

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(1)作为受体大肠杆菌应___________(2分)以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。取用氯化钙溶液处理(增加其细胞壁的通透性)过的受体大肠杆菌,置于试管Ⅱ中,并加入__________________。(2分)

(2)图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入____________________(2分)等物质,用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。

(3)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养,以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒,请预测菌落的颜色,并分析结果(4分)

①______________________________________________________________________。

②___________________________________________________      _____________

 

(1)不含氨苄青霉素抗性基因(或对氨苄青霉素敏感) 在试管Ⅰ中制备好的DNA (2)IPTG、X-gal、氨苄青霉素 (3)①如果长出蓝色菌落,说明自连的运载体pUC118质粒已转入受体菌,但目的基因没有接入运载体(或说明重组质粒没导入受体大肠杆菌) ②如果长出白色菌落,说明重组质粒已导入受体大肠杆菌 【解析】 试题分析:(1)判断重组质粒是否导入大肠杆菌,应依据质粒上的氨苄青霉素抗性基因(标记基因),所以受体细胞应不含有氨苄青霉素抗性基因。向受体细胞中导入的是重组质粒(或重组DNA),即试管I中制备的DNA。 (2)筛选导入重组质粒的大肠杆菌,是根据质粒上的氨苄青霉素抗性基因来进行的,所以培养基中须加入氨苄青霉素。另外导入的质粒中是否插入目的基因,是根据X-gal能否水解及大肠杆菌菌落的颜色来判断的,所以培养基中还需加入IPTG、X-gal。 (3)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养,以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒,根据题意,lacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和X- gal时,X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶,培养基中的X-gal不会被水解成蓝色,大肠杆菌将形成白色菌落。所以: ①如果长出蓝色菌落,说明自连的运载体pUC118质粒已转入受体菌,但目的基因没有接入运载体(或说明重组质粒没导入受体大肠杆菌)。 ②如果长出白色菌落,说明重组质粒已导入受体大肠杆菌。 考点:本题考查基因工程和微生物培养的相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识网络的能力。  
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考点分析:
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(10分)下图是制备分泌抗X抗体的过程,根据图解回答问题:

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(1)给小鼠注射抗原的目的是                

(2)在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有

           的特性。

(3)由图中可看出,单克隆抗体制备过程运用了                 的动物细胞工程技术手段,前者常用的诱导剂与植物原生质体融合不同的是             

(4)动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等,与植物细胞培养基有所不同的是,还含有               

(5)在动物细胞融合过程中,需要将所选取的组织细胞离散开,以利于细胞融合,可用         处理离体组织细胞使之分散开。

(6)图中有两次筛选过程,其中步骤④的目的是筛选出                          ,步骤⑤⑥的目的是筛选出                             

 

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(12分)下图所示胡萝卜的韧皮部细胞通过无菌操作,接入试管后,在一定的条件下,形成试管苗的培育过程,请据图回答下列问题:

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(1)要促进细胞分裂生长,培养基中应有营养物质和激素。激素主要为________________两类植物激素。

(2)此过程依据的原理是_____________,应用的技术是_____________,繁殖方式为__________

(3)AB阶段主要进行的分裂方式是_______B阶段除了细胞分裂外,还进行细胞________等。

(4)此过程要无菌操作,主要是指对______进行灭菌消毒,B阶段需要光照,原因是_____________

(5)试管苗的根细胞没有叶绿素,而叶的叶肉细胞具有叶绿素,这是基因________的结果

(6)愈伤组织的特点为____________________________________。(2分)

 

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(10分)人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA 基因母羊的羊乳中获得。流程如下:

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(1)htPA 基因与载体用_______________________切割后,通过___________连接,以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA,可采用_________________________技术。

(2)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊注射促性腺激素,使其_______________。采集的精子需要经过__________________,才具备受精能力。

(3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是_________________。为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行___________________。利用___________和胚胎移植技术可获得多个转基因个体,这体现了早期胚胎细胞的__________________。

(4)若在转ht-PA基因母羊的羊乳中检测到_________________________,说明目的基因成功表达。

 

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(8分)植物甲具有极强的耐旱性,其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因,并将其转移到耐旱性低的植物乙中,有可能提高后者的耐旱性。 回答下列问题:

(1)理论上,基因组文库含有生物的__________基因;而cDNA 文库中含有生物的___________基因。

(2)若要从植物甲中获得耐旱基因,可首先建立该植物的基因组文库,再从中_________出所需的耐旱基因。

(3)将耐旱基因导入农杆菌,并通过农杆菌转化法将其导入植物____(“甲”或“乙”)的体细胞中,经过一系列的过程得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达,应检测此再生植株中该基因的__________,如果检测结果呈阳性,再在田间试验中检测植株的____________是否得到提高。

(4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交,子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为 3∶1 时,则可推测该耐旱基因整合到了______________(填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”)。(2分)

 

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下列能正确表示高等动物胚胎发育顺序的是

A、受精卵→囊胚→原肠胚→幼体        

B、卵→卵裂→原肠胚→幼体

C、受精卵→囊胚→原肠胚→幼体        

D、受精卵→桑椹胚→囊胚→原肠胚→幼体

 

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