Question

（15分）胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得，流程如下：

（1）筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环，其目的是            。

（2）培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供           。

（3）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和          以防止胡萝卜素的分解；萃取液浓缩前需进行          ，其目的是除去萃取液中的不溶物。

（4）纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为        。

（5）酵母菌R能分泌A酶和B酶两种酶，下图是某课题组对A酶和B酶的实验结果，请分析回答：

①分析图中的实验结果可知，本实验研究的课题是          。

②图中结果显示，在40℃至60℃范围内，热稳定性较好的酶是           。高温条件下，酶容易失活，其原因是        。

③制备A酶和B酶的流程如下图所示：

图中方法Ⅰ是       ，方法Ⅱ是透析法；分别用凝胶色谱法纯化酶的过程中，          的蛋白质会较快从层析柱中洗脱出来。

Answer

（共15分。除特殊注明外，每空1分。）

（1）杀灭接种环上的微生物；

（2）碳源和氮源（缺少一个不给分）；

（3）干燥时间；过滤；

（4）（实验）对照；

（5）（每空2分）①探究（研究）温度对A酶和B酶活性的影响（表述正确，自变量1分，因变量1分）②A酶；高温使酶的空间结构破坏（写“肽键”断裂不的分）；③离心法 ； 相对分子质量较大

【解析】

试题分析：（1）微生物接种时，为了避免其它杂菌的污染，接种过程要进行无菌操作，接种前对接种环灼烧就是为了杀灭接种环上的微生物。

（2）培养基中的蔗糖可为微生物提供碳源，硝酸盐含氮元素，可为微生物提供氮源。

（3）温度过高、干燥时间过长会导致胡萝卜素分解，所以从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和干燥时间；萃取后需将原料中的固体物滤去，因此萃取液浓缩前需进行过滤。

（4）用标准样品可对照检查提取出来的胡萝卜素的纯度，所以在用纸层析法鉴定所提取的胡萝卜素的过程中，需用胡萝卜素标准品作为（实验）对照。

（5）①曲线图的横坐标为自变量，纵坐标表示因变量，分析曲线图显示的结果可知，本实验研究的课题是探究（研究）温度对A酶和B酶活性的影响。②图中结果显示，在40℃至60℃范围内，A酶的活性高于B酶，因此热稳定性较好的酶是A酶。高温会使酶的空间结构遭到破坏而使酶失去活性。③方法Ⅰ是通过将培养液沉淀、去除菌体，保留含酶培养液，此方法为离心法。凝胶色谱法分离蛋白质的原理之一是：分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快，因此相对分子质量较大的蛋白质会较快从层析柱中洗脱出来。

考点：本题考查微生物的培养与应用、植物有效成分的提取、酶的研究与应用、蛋白质技术的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。