Question

（18分）（1）.土壤农杆菌能将自身Ti质粒的T-DNA整合到植物染色体DNA上，诱发植物形成肿瘤。T-DNA中含有植物生长素合成酶基因（S）和细胞分裂素合成酶基因（R）,如图1所示，它们的表达与否能影响相应植物激素的含量，进而调节肿瘤组织的生长与分化。基因工程常用Ti质粒作为运载体，图2表示抗虫棉培育中使用的三种限制酶A、B、C的识别序列以及Ti质粒上限制酶切割位点的分布，抗虫基因内部不含切割位点，两侧标明序列为切割区域。

①据图2分析，切取抗虫基因时，使用限制酶         ，切割Ti质粒时，使用限制酶          。

②成功建构的重组质粒含有限制酶A的识别位点     个，若用酶C处理该重组质粒，将得到     个DNA片段。

③若抗虫基因插入的位置在R基因内部，根据图1可知，筛选出           植株即是成功导入抗虫基因的棉花植株。

（2）.单克隆抗体技术在生物工程中占有重要地位。请回答相关问题：

④                 技术是单克隆抗体技术的基础。

⑤在技术操作中，需要将融合细胞用          培养基进行筛选，并进行克隆化培养和         检测，以得到足够数量的符合要求的杂交瘤细胞。

⑥若将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，可从              中提取出大量的单克隆抗体。

⑦研究人员应用            工程技术，改造了鼠源性抗体分子的结构，降低了鼠源性抗体的人体反应。

Answer

（1）.①酶B和酶C 酶A和酶B ②2 2 ③生根瘤 （2）.④动物细胞培养 ⑤特定的选择（不答“选择”不给分） 抗体 ⑥（细胞）培养液 ⑦蛋白质

【解析】

试题分析：（1）.①分析图2中DNA序列和酶切位点序列可知应使用酶B和酶C切割获取抗虫基因；导入的目的基因时应在T-DNA上，因此Ti质粒应用酶A和酶B切割。

②根据酶B和酶C切割目的基因后留下的粘性末端与酶A和酶B 切割质粒后留下的粘性末端可知，成功建构的重组质粒含有限制酶A的识别位点2个；成功构建的重组质粒用酶C处理能得到2个DNA片段，应是A-C，和C-A片段。

③若抗虫基因插入的位置在R 基因内部，则基因R被破坏不能表达，但S基因结构完整能够表达，根据图1可知，筛选出生根瘤植株即是成功导入抗虫基因的棉花植株。

（2）.④动物细胞培养是其他技术包括单克隆抗体技术的基础。

⑤在单克隆抗体技术操作中，需要将融合细胞用特定的选择培养基筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，并进行克隆化培养和抗体检测，以得到足够数量的符合要求的杂交瘤细胞。

⑥若将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，可从培养液中提取出大量的单克隆抗体。

⑦用蛋白质工程技术，可以改造鼠源性抗体分子的结构，降低鼠源性抗体的人体反应。

考点：本题考查基因工程、单克隆抗体和蛋白质工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。