Question

（15分）根据所学微生物的实验室培养和应用知识，完成下列问题。

(1)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有_________________ 、________和高压蒸汽灭菌。

(2)锥形瓶接种过程应在酒精灯火焰附近进行，防止________污染培养基。对无菌操作时用到的玻璃器皿要用________的方法彻底消灭其中的微生物，用酒精擦拭不能达到目的。

(3)稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的________稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到________的表面，进行培养。

(4)平板划线操作（如右图所示）时要做到以下几点：

①第一次划线及每次划线之前都需要对接种环进行 ________，待接种环冷却后才能伸入菌液，以免  ____________。

②划线时最后一区不要与第一区         。

③划线用力大小要适当，防止用力过大将____划破。

(5)土壤中细菌之所以能分解尿素，是由于它们体内能合成________，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到徨化作用。统计样品中的分解尿素的活菌一般用______法，具体的操作流程是土壤取样→______→微生物的培养与观察 细菌的计数。

(6)统计的菌落往往比活菌的实际数目低，这是因为_________________________。

Answer

（1）灼烧灭菌 干热灭菌

（2）瓶口的微生物 干热灭菌

（3）浓度梯度 琼脂固体培养基

（4）灼烧灭菌 温度太高杀死菌种 相交 培养基

（5）脲酶 稀释涂布平板 样品的稀释

（6）菌落可能由两个或多个细菌连在一起生长而成，所以实际活菌数量要比测得的数量多

【解析】

试题分析：

（1）实验室中常用的灭菌方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法灭菌等。

（2）空气中含有细菌的孢子等，乙醇接种过程中要在酒精灯火焰旁进行，防止空气中的微生物污染培养基；玻璃器皿适宜用干热灭菌的方式进行灭菌。

（3）将菌液进行一系列的梯度稀释，通过涂布接种，将菌液接种到最终达到琼脂固体培养基的表面，进行培养，这样聚集在一起的微生物分散成单个细胞，在固体培养基上形成单菌落，从而达到纯化的目的。

（4）①接种用的接种环等金属工具适宜用灼烧灭菌；接种环必须冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种；

②划线时最后一区不要与第一区相交重合，否则不能分离出单个细菌；

③划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。

（5）尿素分解菌能够分泌脲酶将尿素分解；稀释涂布平板法适宜用活菌的计数统计；从土壤中分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。

（6）由于稀释涂布平板法接种的菌落可能有两个或多个细菌连在一起生长而成，所以实际活菌数量要比测得的数量多。

考点：本题考查微生物的实验室培养的有关知识，意在考查考生识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。