(6×2=12分)动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。
(1)肝脏切成小薄片,这有利于肝脏细胞 。
(2)气室中充入5% C02气体的主要作用是 。
(3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长,但要注意选择抗生素的 ,以保证抗生素对肝脏无害。
(4)有机物X有毒性,可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具,探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。
材料用具:
肝脏小块,外周血淋巴细胞,淋巴细胞培养液,植物凝集素(刺激淋巴细胞分裂);显微镜,载玻片,盖玻片,玻璃皿,滴管;吉姆萨染液(使染色体着色),有机物X溶液等。
实验过程:
①在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞,取4等份,备用。
②利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置,按下表步骤操作(“√”表示已完成的步骤)。
上表中还需进行的操作是: 向乙(或丁)组装置中放置 。
③培养一段时间后,取4组装置中的等量培养液,分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。
④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察 ,并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常,而甲组的淋巴细胞正常,则说明 。
(6分)对烟草愈伤组织器官分化的研究发现,在改变培养基中IAA(生长素)与KT(一种人工合成的细胞分裂素)的比例时,可改变愈伤组织的分化方向,如下图所示。请回答下列问题:
(1)细胞分化的实质是 。
(2)烟草组织块已经分化的细胞经过诱导后,失去其特有的 、 和 而转变成未分化细胞的过程叫做脱分化。
(3)培养基中添加的IAA与KT的比值较高时,有利于 的形成,抑制 的分化。
(7分,每空1分)如右图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图,所用载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A,也不含质粒A上的基因,质粒A导入细菌B后,其上的基因能否得到表达的探究:
(1)将目的基因和质粒相结合形成重组质粒 (重组DNA分子) 需要的工具为: 。
(2)目前把重组质粒导入细菌细胞时,效率还不高;导入完成后得到的细菌,实际上有的根本没有导入质粒,有的导入的是普通质粒A,只有少数导入的是重组质粒。此处可以通过如下步骤来鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒:将得到的细菌涂抹在一个含有氨苄青霉素的培养基上,能够生长的就是导入质粒A或重组质粒的,反之则没有。使用这种方法鉴别的原因是 。
(3)若把通过鉴定证明导入了普通质粒A或重组质粒的细菌放在含有四环素的培养基上培养,会发生的现象:有的能生长;有的不能生长。导入普通质粒A的细菌 (能或不能)生长,因为 ;导入重组质粒的细菌 (能或不能)生长,因为 。
(4)导入细菌B细胞中的目的基因成功表达的标志是受体细胞通过转录和翻译过程形成 这种蛋白质。
(8分)下面甲图中DNA决定某一多肽链中的酪氨酸和丙氨酸过程示意图,乙图示样品 DNA经PCR技术(聚合酶链式反应)扩增,可以获取大量DNA克隆分子。分析回答:
(1)甲图中含有 种核苷酸;丙氨酸的遗传密码子是 。该图表示了DNA中遗传信息的 过程。
(2)有一种贫血症是血红蛋白分子的一条多肽链上,一个酪氨酸被一个苯丙氨酸所替代造成的。此种贫血症的根本原因是 ,即 发生了改变。
(3)乙图的“PCR”与人体内的DNA复制相比有何特殊之处? 。
(4)现在要通过“PCR”得到甲图中DNA片段的1024个克隆片段,则至少要向试管中加入
个腺嘌呤脱氧核苷酸。(此空2分)
(8分)番茄营养丰富,是人们喜爱的一类果蔬。但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因,控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶,该酶能破坏细胞壁,使番茄软化,不耐贮藏。为满足人们的生产生活需要,科学家们通过基因工程技术,培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种。操作流程如图,请回答:
(1)图中载体质粒的实质是 。在番茄新品种的培育过程中,将目的基因导入受体细胞的方法叫做 。
(2)从图中可见,mRNAl和mRNA2的结合直接导致了 无法合成,最终使番茄获得了抗软化的性状。
(3)普通番茄细胞导入目的基因后,经③过程形成 ,然后诱导出试管苗,进一步培养成正常植株。
(4)如图甲,获得目的基因后,构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的 处,DNA连接酶作用于 处。(填“a”或“b”)。
(5)如图乙是该目的基因表达过程中的一个阶段,图中3和4的核苷酸相同否?
说明理由 。
科学家通过基因工程培育抗虫棉时,需要从苏云金芽孢杆菌中提取出抗虫基因,“放入”棉花的细胞中与棉花的DNA结合起来并发挥作用,请回答下列有关问题:(9分)
(1)从苏云金芽孢杆菌中切割抗虫基因所用的工具是 ,此工具主要存在于 中,其特点是 。
(2)基因表达载体的组成除了有目的基因外,还必须有复制原点、启动子、 和 。
(3)进行基因操作一般要经过的四个步骤是:
, ,
, 。