Question

天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是（     ）

A．提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因B

B．利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B

C．利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞

D．将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞

Answer

A

【解析】

试题分析：是可行方案的前半部分，后面应该包括把扩增到的基因B克隆到双元载体，转基因到玫瑰花细胞的操作，A正确；如果已经从基因文库中筛选出含有基因B的克隆，可以用限制性核酸内切酶酶切获取基因B片段，实际上，对序列未知的情况下，这样得到的序列比逆转录后扩增更少突变，能更准确得到基因B的序列；基因文库的序列含有内含子，虽然都是植物，但不一定有相同的转录后加工系统，而且含有内含子的序列往往长很多，不利于完成后面的克隆表达实验操作，B错误；通常用T4 DNA连接酶将基因B与质粒连接，利用DNA聚合酶来连接是不行的，但如果把答案中的连接理解为重组克隆，现在是有办法用DNA聚合酶克隆的，但用这种方法一般是转到有修复缺刻功能细菌，直接转玫瑰细胞不行，C错误；基因B如果已经拿到并克隆到载体上，也应该转化大肠杆菌后通过三亲本杂交或二亲本杂交把基因转入农杆菌，或直接把DNA电击转入农杆菌．因为大肠杆菌不能完成感染并把基因转入玫瑰细胞，D错误。

考点：本题主要考查基因工程应用的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。