Question

（8分）人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：

（1）htPA基因与载体用_________切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用_________技术。

（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其__________。采集的精子需要经过才具备受精能力。

（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是__________。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行__________。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，该过程的生殖方式是__________。

（4）若检测到转ht-PA基因母羊_________，说明目的基因成功表达。

Answer

（1）同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶） DNA分子杂交

（2）超数排卵 获能

（3）显微注射法 性别鉴定 无性生殖

（4）羊乳中有htPA（或人组织纤溶酶原激活物）

【解析】

试题分析：（1）分析流程图可知，htPA基因与载体用同种限制酶切割后露出血糖的黏性末端，通过DNA连接酶连接，可构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用DNA分子杂交技术。

（2）对供体母羊注射促性腺激素，使其超数排卵，可获取更多的卵（母）细胞。采集的精子需要经过获能处理才具备受精能力。

（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是显微注射法。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，该过程的生殖方式是无性生殖。

（4）若检测到转ht-PA基因母羊的羊乳中有htPA，说明目的基因成功表达。

考点：本题考查基因工程和胚胎工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。