在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因A控制合成的抗冻蛋白A有较好的应用价值，通过转基因技术获得抗寒能力提高的植株。回答有关问题：
（1）从深海鱼提取和纯化DNA时，选择NaCl溶液的合适浓度，利用DNA和其它杂质在不同NaCl溶液中 的特性，达到分离目的，加入一定量 可以进一步获得含杂质较少的DNA。
（2）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生 末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生 黏性末端的限制酶。
（3）为了检测A基因转录的mRNA是否翻译成抗冻蛋白A，需从转基因生物提取 ，用相应的抗体进行 。
（4）若要用动物细胞工程技术，制备抗A抗体的杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞，并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞按一定比例加入试管中，再加入 诱导细胞融合。细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有 ，体系中出现多种类型细胞的原因是 。
临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：
（1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用 法或 法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。
（2）取该单菌落适当稀释，用 法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。
（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A ；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B ；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明 ；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的 。
（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素 。
（11分）农业生产上种植的玉米一般为雌雄同株（雄花序在顶端，雌花序在叶腋）。基因型B T 表现为雌雄同株，B tt表现为雌株（顶端和叶腋都长有雌花序），bbT 表现为雄株（顶端有雄花序，叶腋不长花序），bbtt表现为雌株（顶端有雌花序，叶腋不长花序）。这两对等位基因位于两对同源染色体上。请回答有关问题：
（1）基因型为 的雄株与基因型为 的雌株杂交，后代的性别有雄株和雌株，且分离比为1：1。
（2）现有基因型为BbTt（甲）和bbtt（乙）的玉米种子，做测交实验来证明玉米性别的遗传符合基因自由组合定律。取甲、乙玉米种子间行种植，结实后，收获 植株上玉米种子，将收获的种子再播种，植株中若 （性别表现及比例），则玉米性别的遗传符合基因的自由组合定律。
（3）现有一批基因型为BbTt的玉米植株，欲用单倍体育种方法选育出基因型为bbTT的雄株和BBtt的雌株，请写出简要的育种过程。
。
（10分）某岛屿由海底火山喷发形成，现已成为旅游胜地，岛上植被茂盛，风景优美。回答有关问题：
（1）该岛屿不同地段物种组成上的差异是群落 结构的体现。
（2）该岛屿形成后最初进行的群落演替属于 演替，演替达到相对稳定的阶段后，群落内物种组成 （会、不会）变化。
（3）旅游观赏体现了生物多样性具有非实用意义的 （直接、间接、潜在）价值，旅游可能使岛上的群落演替按照不同于自然演替的 进行。
（4）近年来，该岛周边海域已有不同程度富营养化，原因是含氮、磷等元素丰富的污染物的排放量超过了海水净化能力的限度，使其 下降。富营养化水体中造成鱼类大量死亡的原因有 ，有毒物质增加等。
（8分）皮质醇是一种由肾上腺皮质分泌的固醇类激素，在应付压力中扮演重要角色。动物被运输过程中，体内皮质醇激素的变化能调节其对刺激的适应能力。下图为皮质醇分泌的调节示意图。据图分析回答下列有关问题：
（1）合成皮质醇的细胞器是 。皮质醇对细胞代谢起着 （催化、调节）作用，皮质醇作用的靶细胞还包括 细胞和垂体细胞。
（2）运输刺激使下丘脑分泌激素增加的结构基础是 ；图中M促进皮质醇分泌的过程属于 （调节），结合高中所学知识，M名称为 。
（3）动物被运输过程中，体内皮质醇含量变化情况为 。
（10分） 某实验小组为研究酵母菌的细胞呼吸，按下表设计进行实验，分组后，在相同的适宜条件下培养8～10小时，请结合实验结果进行分析，回答有关问题：
实验材料 | 取样 | 处理 | 分组 | 培养液 | 供氧情况 | |
适宜浓度 酵母菌液 | 50 mL
| 破碎细胞 （细胞不完整） | 甲 | 25 mL | 75 mL | 无氧 |
乙 | 25 mL | 75 mL | 通氧 | |||
50 mL | 未处理 | 丙 | 25 mL | 75 mL | 无氧 | |
丁 | 25 mL | 75 mL | 通氧 | |||
（1）丙、丁组中酵母菌细胞呼吸第一阶段反应完全相同，该反应变化是
。
（2）甲、乙、丙、丁四组中能产生CO2有 ，可以用 作为检测CO2多少的指标。
（3）丁组能量转换率与丙组 （相同、不同），丁组的氧气消耗量 （大于、小于、等于）乙组。
（4）有氧呼吸产生的[H]，经过一系列的化学反应，与氧结合形成水。2，4-二硝基苯酚（DNP）对该氧化过程没有影响，但使该过程所释放的能量都以热的形式耗散，表明DNP使分布在
的酶无法合成ATP。若将DNP加入丁组中，葡萄糖的氧化分解 （填“能”或“不能”）继续进行。
