Question

工业生产中会产生一些有机废水，某细菌X在生物处理废水中能发挥很大作用，现要要对其进行筛选。

培养液	NaNO3	牛肉膏	K2HPO4	MgSO4·7H2O	KCl	NiSO4
A	-	-	1g/L	1g/L	0.5g/L	0.01g/L
B	3g/L	3g/L	1g/L	1g/L	0.5g/L	0.01g/L
C	3g/L	-	1g/L	1g/L	0.5g/L	0.01g/L

（1）应选用上表中的       （填图中字母）培养液，解释不选用其他培养液的原因：a                                 ，b                                   。

（2）接种前培养基必须进行          灭菌，为确定培养基灭菌是否彻底，可设置               的空白培养基为对照组；若要制作平板，常在培养液中加入            作为凝固剂，培养时，需将平板          放置。

（3）为获得单个菌落，某同学将细菌X接种到正确的培养基中，经培养后，其中一个平板的菌落分布如右图所示，该同学的接种方法是                         ，所用的接种工具是                 ，该同学可能的操作失误是                                                         。

（4）对细菌X计数时，可吸取菌液１ml稀释1000倍，然后吸取稀释后的菌液0.2ml，接种于平板上培养，一段时间后观察到三个平板上的菌落数为61、62、63，则该菌液中的细菌X数量约为                 个/ml。

Answer

（1）C A培养基中缺乏氮源 B培养基中含有机废水以外的碳源（后两空可交换顺序）（2）高压蒸汽 不加入废水（或加入等量蒸馏水） 琼脂 倒置 （3）稀释涂布平板法 涂布器 涂布不均匀 （4）3.1×105

【解析】

试题分析：（1）分析各培养液中的成分可知，为了筛选能分解有机废水中的有机物的细菌，培养液中不能加入有机营养，如牛肉膏，但为了保证细菌的正常生长繁殖，培养基中有不能缺乏氮源，所以最好选择C培养液。（2）为了防止杂菌感染，接种前培养基必须进行高压蒸汽灭菌。为确定培养基灭菌是否彻底，可设置不加入废水或加入等量蒸馏水的空白培养基为对照组；若要制作平板，常在培养液中加入琼脂作为凝固剂；培养时，需将平板倒置放置。（3）培养后平板的菌落分布如右图所示，说明该同学的接种方法是稀释涂布平板法，所用的接种工具是涂布器，可能的操作失误是涂布不均匀。（4）根据题意，菌液中的细菌X数量约为100（61+62+63）/(3×0.2) =3.1×105个/ml。

考点：本题考查微生物培养方面的知识，意在考查学生的识图能力和对所学知识要点的理解能力以及把握知识间的内在联系的能力。能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用的能力。