Question

酵母菌作为一种常见的微生物，在传统和现代生物技术中得到了广泛的应用。请回答下列问题：

（1）酵母菌广泛分布在自然界中，科研人员为了分离、筛选蓝莓果酒专用酵母来改善蓝霉果酒的品质，进行了如下实验：

①  取不同品种的成熟蓝莓制果浆，置于适宜温度的恒温培养箱中自然发酵，直至产生大量气泡和明显酒味。取不同品种成熟蓝莓的原因是    。

②将蓝莓发酵液用    进行梯度稀释后，进行涂布平板操作（每个梯度3个平板），恒温培养2d，根据酵母菌菌落特征挑取单菌落。

③将挑取的单菌落扩大培养后，通过    法分离纯化，然后保存菌种。

④检测筛选菌株的发酵性能，根据实验结果推知，    （品种）对乙醇和酸的耐受性最强，是较理想的酿酒菌种。

品  种	乙醇体积分数/%	pH
8%	10%	12%	14%	15%	4.00	2.98	2.03	1.48
葡萄酿酒酵母	++++	++++	+	-	-	++++	++++	-	-
BL-21	++++	++++	+	-	-	++++	++++	-	-
BF-09	++++	++++	++	-	-	++++	++++	+	-
BF-17	++++	++++	++	+	-	++++	++++	++	-

（注：+数量表示菌落数量的多少，-表示没有菌落生长）

（2）下图是固定化酵母发酵与游离酵母制作蓝莓果酒发酵的对比结果，从图中可以看出，两者发酵速率相近，但发酵前期游离发酵比固定发酵产生的酒精量多，主要原因是    ；后期游离酵母发酵速度减慢，除了底物浓度降低外，还可能是因为    。相较于固定化酶技术，固定化酵母细胞常用的方法是    ，固定化酵母发酵的主要优点是    。

Answer

（1）①不同品种蓝莓上附着有不同品种的酵母菌 ②无菌水 ③平板划线 ④BF-17 （2）游离酵母和营养液的接触更充分，酒精排出更快 酒精对游离酵母的抑制作用更强 包埋法 可固定一系列酶，催化一系列化学反应

【解析】

试题分析：（1）①自然界中酵母菌种类繁多，它们通常分别也不同，所以实验中取不同品种成熟蓝莓就是观察不同品种蓝莓上附着有不同品种的酵母菌的发酵情况。②发酵过程中要尽量减少杂菌污染，所以发酵液用无菌水进行梯度稀释。③分离纯化菌种通常采用平板划线法。④对比分析表中不同酵母在同样的乙醇和酸度环境中的发酵产生乙醇的多少可知，BF-17耐受性最强。（2）从图中可以看出，两者发酵速率相近，但发酵前期游离发酵比固定发酵产生的酒精量多，主要原因是游离酵母和营养液的接触更充分，酒精排出更快。后期游离酵母发酵速度减慢，可能是因为底物浓度降低和酒精对游离酵母的抑制作用更强等。固定化酵母细胞常用方法是包埋法；固定化酵母发酵的主要优点是可固定一系列酶，催化一系列化学反应。

考点：本题以酵母菌为载体，主要考查微生物培养方面的知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力以及具有对一些生物学问题进行初步探究的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理。