Question

【生物——选修1：生物技术实践](15分)

某生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下  实验，并成功筛选到能降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如表所示，实验步骤如图所  示。请分析回答：

(1)培养基中加入尿素的目的是____，该培养基是____培养基（按功能分类）。 从同化作用类型来看的，该菌属于____。

(2)实验需要振荡培养，目的是____，转为固体培养时，常采用____的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

(3)在实验过程中：①培养基、培养皿；②玻棒、试管、锥形瓶、吸管；③瘤胃中液体。其中需要灭菌的是____（填序号）。

(4)分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学实验结果差异的原因可能有____（填序号）。①取样不同②培养基污染③操作失误④没有设置对照

(5)以尿素为唯一氮源的培养基培养“目的菌”后，加入____指示剂后变红色，说明“目的菌”能分解尿素。理由是__________________.

(6)为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数，将接种的培养皿放置在37恒温培养箱中培养24h-48h．观察并统计具有红色环带的菌落数，结果如下表，其中____倍的稀释比较合适。

Answer

（1）提供氮源（筛选目的菌） 选择 异养型 （2）为目的菌提供氧气 稀释涂布平板法

(3) ①② (4) ①②③ (5)酚红 细菌分解尿素生成氨，PH上升，遇酚红指示剂变红 （6）

【解析】

试题分析：（1）培养基中加入尿素的目的是选择能够分解纤维素的微生物，该培养基为选择培养基。该菌利用现成有机物为物质和能量来源。为异养型。

（2）实验需要振荡培养，目的是让细菌充分接触氧气。固体培养时，常采用平板划线法接种。

（3）灭菌是彻底消灭其他微生物，避免对培养的菌种影响。故①培养基、培养皿为菌种生存场所，需要灭菌；②玻棒、试管、锥形瓶、吸管为接种工具，需要灭菌；③瘤胃中液体含有目的菌，不能灭菌。

（4）甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落的，多于其他同学，原因可能为：①取样不同，样品本身含有较多菌种；②培养基污染，能够分解尿素的微生物没有被消灭；③操作失误，接种样品稀释浓度弄错；④设置对照，目的是排除其他因素影响，与菌落数无直接关系。

（5）细菌分解尿素生成氨，PH上升，遇酚红指示剂变红。

（6）测定土壤中细菌，一般选用104、105、106倍稀释液进行平板培养，保证菌落数在30～300之间，据表格分析，106倍稀释液菌落数为36 ，105倍稀释液菌落数为248 ，较合适。

考点：本题考查微生物的培养相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力。