Question

研究被石油污染过的土壤中细菌数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤，对分解石油的细菌进行分离和提纯，回答下列相关问题。

⑴配置好的培养基通常可以使用__________灭菌。培养基的营养成分包括水、无机盐、碳源和______等。其中碳源应该以_______为唯一碳源。

⑵纯化菌种时，为了得到单个菌落，常采用的接种方法有两种，即______和________。

⑶该实验中使用的是固体培养基，要得到固体培养基，应在培养基中加入______做凝固剂。

⑷为了对土壤中分解石油的细菌进行计数，科研人员把不同稀释度的菌液进行涂布（每个平板加0.1毫升菌液）、培养、计数。统计结果发现稀释倍数为10³的三个平板中，菌落数分别为45、38、37。问每克土壤中能分解石油的细菌数约为______个。酵母菌细胞中有_________这是酵母菌与分解石油的细菌在结构上的最大区别。

⑸若用¹⁵N对分解石油的细菌的DNA进行标记，然后把这个细菌放在含¹⁴N培养基中培养，让其连续分裂四次，则后代中，含¹⁵N的DNA的细菌和含¹⁴N的DNA的细菌之比为______。若把分解石油的细菌的DNA提取出来用DNA酶处理得到的产物是_____。

Answer

⑴高压蒸汽、氮源、石油

⑵平板划线法、稀释涂布平板法

⑶琼脂

⑷4×105、成形的细胞核

⑸1：8、脱氧核糖核苷酸

【解析】

试题分析：（1）对培养基灭菌通常采用高压蒸汽灭菌。培养基的营养成分包括水、无机盐、碳源和氮源等；为了分离和提纯能分解石油的细菌，所以所用的唯一碳源只能是石油。（2）纯化菌种时，为了得到单个菌落，常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。（3）要得到固体培养基，应在培养基中加入其凝固作用的琼脂。（4）根据题意，每克土壤中能分解石油的细菌数约为103×（45+38+37）/3÷0.1=4×105个。酵母菌是真核生物，细菌是原核生物，二者最大的区别是酵母菌性别内有成形的细胞核。（5）连续分裂四次，产生的DNA共有24=16个；其中只有2个含15N的DNA的细菌（因为1个亲代DNA只有2条DNA单链,分别遗传到2个子代DNA中），而含14N的DNA的细菌是所有都有，所以二者之比为1:8. DNA酶处理DNA，只能将DNA水解为脱氧核苷酸。

考点：本题考查本题考查微生物的培养、真核细胞和原核细胞的区别、DNA复制等相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力以及能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用的能力。