Question

世界苦荞在中国，中国苦荞在凉山。苦荞富含黄酮类化合物等营养物质，在降血糖、降血脂等方面功效显著。查尔酮合成酶（CHS）是黄酮类化合物合成的关键酶，下图为将修饰后的 CHS基因导入苦荞，培育高产黄酮苦荞品系示意图。

（1）过程①中能切开质粒的酶是__________。它能在质粒特定的部位切割的原因是__           ___。

（2）图中常用的是__________培养基。 接种前，用灭菌后未接种的培养基培养一段时间，观察是否形成菌落，目的是_______________________。

（3）过程②、③分别是____  ___和______  _。苦荞体细胞能培养成植株的根本原因是____  ____。

（4）为探究激素对于过程诱导愈伤组织的影响，某研究小组在培养基中加入6-BA和2,4─D，灭菌后分别接种，在适宜条件下培养一段时间后，统计愈伤组织的诱导率，实验结果如下表：

该实验的因变量是____________，诱导的最佳组合是_____________________。

（5）判断转基因苦荞培育是否成功，可比较转基因苦荞与普通苦荞的__________含量，也可测定细胞中CHS含量。 用凝胶色谱法分离CHS时，CHS最先从色谱柱中洗脱出来，说明CHS相对分子质量较___________。

Answer

（1）限制性核酸内切酶（限制酶） 能识别特定的核苷酸序列并在特定的切点上切割DNA分子

（2）MS 判断培养基灭菌是否彻底

（3）脱(去)分化 再分化 植物细胞的全能性（细胞中含有发育成完整个体所必需的全部基因）

（4）诱导率 0.1mg•L -1 6-BA 和 4mg•L-12,4-D

（5）黄酮类化合物 大

【解析】

试题分析：

（1）过程①是基因表达载体的构建，过程中能切开质粒的酶是限制性核酸内切酶．它能在质粒特定的部位切割的原因是能识别特定的核苷酸序列并在特定的切点上切割DNA分子，形成粘性末端。

（2）图中常用的是MS培养基．在接种前，用灭菌后未接种的培养基培养一段时间，观察是否形成菌落，目的是判断培养基灭菌是否彻底，以防杂菌污染。

（3）过程②、③分别是脱分化和再分化。苦荞体细胞能培养成植株的根本原因是植物细胞的全能性即细胞中含有发育成完整个体所必需的全部基因。

（4）根据题意和图表分析可知：该实验的因变量是诱导率，诱导的最佳组合是0.1mg•L -16-BA和4mg•L-12，4-D。

（5）判断转基因苦荞培育是否成功，可比较转基因苦荞与普通苦荞的黄酮类化合物含量，也可测定细胞中CHS含量．用凝胶色谱法分离CHS时，CHS最先从色谱柱中洗脱出来，说明CHS相对分子质量较大。

考点：本题综合考查基因工程和植物细胞工程的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络的能力。