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近十年来,PCR技术(多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室里的一种常规手段,其原...

近十年来,PCR技术(多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室里的一种常规手段,其原理是利用DNA半保留复制,在试管中进行DNA的人工复制(如图),在很短的时间内,将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使实验所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。

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(1)PCR技术能把某一DNA片段进行扩增,依据的原理是:                                     

(2)加热使DNA双链打开,这一步是打开       键,称为        ,在细胞中是在             的作用下使此键断裂。

(3)当温度降低时,引物与模板             端结合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最终合成2DNA分子,此过程中加入四种脱氧核苷三磷酸的目的是           ,遵循的原则是           

(4) PCR技术的必要条件,除了模板、原料、ATP、酶以外,至少还需要三个条件. 即:液体环境、适宜的                                        

(5)PCR一般要经历三十多次循环,每次循环可分为                          三个步骤。

 

(1)DNA分子具有双螺旋结构和DNA分子中碱基的互补配对 (2)氢 解旋 解旋酶 (3)3’ 既是原料,又能提供能量 碱基互补配对原则 (4)温度 酸碱度 (5)变性、退火和延伸 【解析】 试题分析: (1)PCR技术又称聚合酶链式反应,是一项在生物体外复制特定DNA分子的核酸合成技术。PCR技术能把某一DNA片段进行扩增,依据的原理是:DNA分子具有双螺旋结构和DNA分子中碱基的互补配对。 (2)加热使DNA双链打开,这一步是打开氢键,称为解旋;在细胞中是在解旋酶的作用下使此键断裂。 (3)当温度降低时,引物与模板3’端结合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最终合成2个DNA分子,此过程中加入的四种脱氧核苷三磷酸既是原料,又能提供能量;遵循的原则是碱基互补配对原则。 (4)PCR技术的必要条件,除了模板、原料、ATP、酶以外,至少还需要三个条件. 即:液体环境、适宜的温度和酸碱度。 (5)PCR一般要经历三十多次循环,每次循环可分为变性、退火和延伸三个步骤。 考点:本题考查PCR技术的相关知识,意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。  
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考点分析:
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下列是关于血红蛋白的提取和分离实验中关键步骤,其中正确的是(  

A.蛋白质的提取和分离一般可分为粗分离、样品处理、纯化、纯度鉴定等4步

B.蛋白质的提取和分离实验可以以猪、牛、羊、蛙等动物的血液为材料分离血红蛋白

C.对样品的处理过程分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、透析和分离血红蛋白等

D.对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳

 

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生物组织中有机物的提取方法有多种,如电泳、压榨、萃取等,不同的有机物提取方法各不相同。下列有关的说法中不正确的是( 

A.香料工业中“液体黄金”玫瑰油的提取中要求不含有任何添加剂或化学原料,其提取方法主要是水蒸气蒸馏

B.杏仁油富含矿物质和维生素,主要通过压榨法提取

C.用萃取法提取胡萝卜素,萃取的效率只受萃取剂的性质和使用量的影响

D.为了纯化提取的DNA,往DNA滤掖中加入嫩肉粉,其目的是木瓜蛋白酶能够分解蛋白质

 

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从细胞中提取某种特定的蛋白质比提取DNA难度大,其原因不是(    )

A.蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件更敏感,更易失活

B.蛋白质的空间结构多样,理化性质各不相同,使得蛋白质的提取没有统一的方法

C.提取某种特定的蛋白质需据其特性摸索提取的程序

D.提取血红蛋白程序可分为样品处理、粗分离、纯化、纯度的鉴定四大步

 

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下列有关PCR技术的实验过程叙述,不正确的是( 

A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现

B.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的

C.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸

D.PCR与细胞内DNA复制相比所需酶的最适温度较高

 

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蛋白质的分离与提纯技术是蛋白质研究的重要技术,下列有关叙述不正确的(   )

A.根据蛋白质分子不能通过半透膜的特性,可将样品中各种不同蛋白质分离

B.根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小,可通过电泳分离蛋白质

C.根据蛋白质相对分子质量的大小,可通过凝胶色谱法分离蛋白质

D.根据蛋白质的分子大小、密度不同,可通过离心沉降法分离蛋白质

 

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