Question

毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KlFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关．获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图．

（1）过程①构建的重组表达载体除具有KlFⅡ基因外，还必须有          、            以及等．其中标记基因的作用是                        ．

（2）在过程②中，用              处理能将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞．在培养过程中，需将成纤维细胞置于pH值约为               培养液中，并且放在含95%的空气加             的混合气体的培养箱中进行培养．

（3）在过程③中，卵母细胞除可从活体          中采集外．还可以从已宰杀的母羊             中获取；成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行去核处理，同时用微型吸管吸走           ．

Answer

（1）启动子 终止子 标记基因 用于鉴别受体细胞中否含有目的基因

（2）胰蛋白酶或胶原蛋白酶 7.2-7.4 5%CO2

（3）输卵管 卵巢 第一极体

【解析】

试题分析：

（1）分析图形可知，过程①是构建重组表达载体，完整的基因表达载体除具有KlFⅡ基因（目的基因）外，还必须有启动子、终止子以及标记基因和复制原点等．其中标记基因的作用是用于鉴别受体细胞中否含有目的基因。

（2）过程②是动物细胞培养，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理能将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，需将成纤维细胞置于pH值约为7.2-7.4培养液中，并且放在含95%的空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。

（3）过程③是提取卵母细胞，卵母细胞除可从活体输卵管中采集外，还可以从已宰杀的母羊卵巢中获取；成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行去核处理，同时用微型吸管吸走第一极体。

考点：本题考查基因工程动物、细胞培养及胚胎工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。