Question

科学家将鱼的抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高。回答下列相关问题:

（1）在该过程中，研究人员首先获取目的基因，并采用                技术対目的基因进行扩增，该技术需要的条件是:引物、酶、原料和                       。

（2）为了在番茄中获得抗冻蛋白必须将抗冻蛋白基因连接在质粒中的             之后。基因工程核心步骤的名称是                           。

（3）研究人员通常采用                      法将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄细胞内，通常采用                      技术，在分子水平检测目的基因是否翻译成了相应的蛋白质。

（4）抗冻番茄的获得要经过脱分化和再分化过程，通过脱分化过程形成             组织，该组织在再分化过程中细胞分裂的方式是              。

Answer

（1）PCR 模板

（2）启动子 基因表达载体的构建

（3）农杆菌转化 抗原—抗体杂交

（4）愈伤 有丝分裂

【解析】

（1）基因工程中，可采用PCR技术対目的基因进行扩增，该技术需要的条件是引物、酶、原料和模板。

（2）基因工程核心步骤是基因表达载体的构建，该基因工程中为了保证目的基因在受体细胞内成功表达，必须将抗冻蛋白基因连接在质粒中的启动子之后。

（3）将目的基因导入植物细胞常采用农杆菌转化法；在分子水平检测目的基因是否翻译成了相应的蛋白质，通常采用抗原—抗体杂交技术，若检测出杂交带，则表明目的基因翻译成了相应的蛋白质。

（4）植物组织培养的脱分化过程形成愈伤组织，再分化过程中细胞分裂的方式是有丝分裂。

【考点定位】基因工程、植物组织培养

【名师点睛】1.PCR技术：PCR技术即DNA扩增技术，常用于目的基因的体外扩增，仪器是PCR扩增仪，需要的条件是引物、酶、原料和模板，其中扩增一个目的基因需要的引物有2种，数量是2n+1-2个；酶是耐高温的DNA聚合酶，原料是4种脱氧核苷酸，模板是目的基因的两条脱氧核苷酸链。

2.基因工程核心步骤是基因表达载体的构建，构建成功的基因表达载体需要含有启动子、目的基因、终止子、标记基因和复制原点等组分；其中启动子的作用是启动目的基因在受体细胞及其子代细胞内转录，终止子的作用是让目的基因在受体细胞及其子代细胞内的转录过程终止，启动子和终止子共同作用保证目的基因在受体细胞及其子代细胞内成功表达；标记基因用于检测目的基因是否导入受体细胞；复制原点的作用是保证目的基因在受体细胞内成功复制，从而使受体细胞分裂产生的子代细胞内都含有目的基因。