Question

氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。某研究小组依照下图所示实验方案筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如表1。

（1）从用途上来说，Ⅱ号培养基属于____________培养基，在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是_________________。配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培养基成分外，还应添加1％的____________。在Ⅱ号培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒过来放置，这样做的目的是_________________________________。

（2）培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是_________________________________。

实验室中，培养基灭菌常用的方法是__________________________。

（3）将Ⅰ号培养基中的微生物接种Ⅱ号培养基中，采用的最佳接种方法是           ，

到将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养，得到生长曲线如下图所示，此过程

采用______________________________（方法）统计菌体数。从图中可知，SP1菌在

__________________培养条件下最早停止生长，其原因是_____________________________

____________________________。

Answer

（1）选择（2分） 硝酸铵 琼脂 防止皿盖上的水珠落入培养基（2分）

（2）先调pH，后灭菌（2分） 高压蒸汽灭菌

（3）稀释涂布平板法（2分） 抽样检测法（血球计数板计数法）

20mg/L氯苯 碳源最早耗尽（2分）

【解析】

试题分析：

（1）由表中内容可知培养基II中没有碳源，所以可以选择自养型的生物，故是选择培养基。II号培养基中的硝酸铵可以提供氮源。固体培养基需要加入琼脂，倒平板时应倒置是为了防止皿盖上的水珠落入到培养基上。

（2）应先调pH再灭菌，这样可以防止灭菌后调PH时污染。培养基一般采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。

（3）纯化菌种可以用稀释涂布平板法和平板划线法，由图可知得到的菌落是均匀的所以用的是稀释涂布平板法。对细菌的计数可以采用抽样检测法。由图可知SP1菌在20mg/L氯苯最先停止生长，原因应是提供碳源的氯苯少，碳源最先耗尽。

考点：本题考查细菌的分离和培养相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度和应用能力。