Question

下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的是

A．用于鉴定还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定

B．脂肪的鉴定实验中需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴

C．鉴定还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液

D．用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且必须现配现用

Answer

B

【解析】鉴定还原糖的斐林试剂由质量浓度为0．1 g／mL的氢氧化钠溶液（甲液）和质量浓度为0．05 g／mL的硫酸铜溶液（乙液）配制而成，鉴定蛋白质的双缩脲试剂，成分是质量浓度为0．1 g／mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0．01 g／mL的硫酸铜溶液，浓度不同，所以鉴定还原糖的斐林试剂甲液和乙液，不可直接用于蛋白质的鉴定，A错；脂肪的鉴定实验中，可以用花生的组织样液滴加苏丹III（苏丹IV），或者是用花生的子叶做切片后借助于显微镜观察，但若想看到被染成橘黄色的脂肪滴，则需要用显微镜，B正确；鉴定还原糖时，需先把氢氧化钠溶液（甲液）和硫酸铜溶液（乙液）混合后再使用，且必须现配现用，C错；而用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂，要先加A液，后加B液，摇匀后直接观察即可，D错。

【考点定位】还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定

【名师点睛】还原糖的鉴定原理 生物组织中常见的还原糖有葡萄糖、果糖、麦芽糖。可用斐林试剂检验生物组织中还原糖存在与否，而不能鉴定非还原性糖。本实验最理想的实验材料是还原糖含量较高的植物组织（或器官），而且组织的颜色较浅或近于白色的，如苹果和梨的果实。经试验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。

斐林试剂由质量浓度为0．1 g／mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0．05 g／mL的硫酸铜溶液配制而成，二者混合后再使用，反应过程中溶液的颜色变化过程为：浅蓝色棕色砖红色（沉淀）。

用于鉴定脂肪的实验材料 准备实验材料最好选择富含脂肪的种子，如花生种子（取其子叶）。供实验用的花生种子，必须提前浸泡3～4 h。浸泡时间短了，不容易切成片；浸泡时间过长，则组织太软，切下的薄片不易成形。可选用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液。苏丹Ⅲ染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色，苏丹Ⅳ染液遇脂肪的颜色反应为红色。因苏丹Ⅳ染液与脂肪的亲和力比较强，所以，染色的时间应比较短，一般为1 min左右。

蛋白质的鉴定原理 鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，使用的是双缩脲试剂。实验材料最好选用富含蛋白质的生物组织（或器官），植物材料常用的是大豆种子磨成的豆浆，动物材料常用的是稀释的鸡蛋（卵白）。与还原糖的鉴定的比较

比较项目

试剂及成分

原理

溶液浓度

方法

加热与否

结果

可溶还原糖的鉴定

斐林试剂NaOH和CuSO4

新配制的Cu（OH）2溶液

NaOH浓度为0．1g/mL，CuS04的浓度为0．05g／mL

先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合，而后立即使用。

水浴加热

砖红色沉淀

蛋白质的鉴定

双缩脲试剂NaOH和CuSO4

在碱性环境下的Cu2+

NaOH的浓度为0．1g／mL，CuS04的浓度为O．01g／mL

先加入Na0H溶液，然后再加CuS04溶液。

（不能过量）

不需要

溶液呈紫色

注意：1、关于斐林试剂与双缩脲试剂，记准混合后加入——斐林试剂，且现配现用；分别加入——双缩脲试剂（先加A液，后加B液，且B液不能过量）。两者成分相同，但CuSO4溶液的浓度不同，所以不能混用。

2、加热。只有鉴定还原糖时，需要在50～65 ℃温水浴中加热才能出现砖红色沉淀，其余两个实验不需加热。

3．显微镜。脂肪鉴定时可用显微镜，如要观察橘黄色脂肪颗粒，则一定要在显微镜下观察。