Question

（7分）海栖热袍菌生活在55～90℃的海底火山口处水域，其产生的乳酸脱氢酶（LDH）具有极强耐热性。研究人员利用基因工程技术生产该酶以用于工业制备NAD⁺（一种辅酶），基本技术流程如下图。请回答：

（1）过程①中，应提取______的基因组DNA作模板；同时根据___________基因的核苷酸序列合成引物，过程①中使用的工具酶为____________________

（2）进行过程③前，利用_______________处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞。

（3）以鉴定目的基因是否成功表达，此方法称为___________

Answer

（1）海栖热袍菌 LDH（或目的） Taq酶

（2）Ca2+（或CaCl2）

（3）42℃ 蛋白质 抗原-抗体杂交法

【解析】

试题分析：

（1）分析过程图可知，过程①是利用PCR技术扩增目的基因，应提取海栖热袍菌的基因组DNA作模板；同时根据LDH（或目的）基因的核苷酸序列合成引物，该过程①中使用的工具酶为耐高温的Taq酶。

（2）过程③是将目的基因导入受体细胞，需利用Ca2+（或CaCl2）处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞。

（3）过程④是目的基因的检测与鉴定，根据42℃条件下启动子活性完全激发的特点，应将大肠杆菌置于42℃条件下诱导培养；然后提取大肠杆菌的蛋白质进行检测，以鉴定目的基因是否成功表达，此方法称为抗原-抗体杂交法。

考点：本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能从过程图中获取有效信息，运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理判断或得出正确结论的能力。