Question

美国科学家Sanger因发明了链终止．DNA测序法而再获诺贝尔奖。通过向DNA复制体系中加入能够终止新链延伸的某种脱氧核苷酸类似物，可以得到各种不同长度的脱氧核苷酸链，再通过电泳呈带（按分子量大小排列），从而读出对应碱基的位置。下图表示测定DNA新链中腺嘌呤位置的操作方法，据图作答

（1）操作的第一步是通过加热破坏         从而使DNA分子的双链打开，在细胞中这是在__________酶的作用下完成的。

（2）根据图中的模板链，对应合成的最长新链的碱基序列是（自上而下读出）        。

（3）要通过以上操作精确地测出DNA链上每一个碱基的位置，电泳分离结果必须能把     区分开来。

（4）为了能够从电泳结果直接读出模板链中鸟嘌呤的位置，进行以上操作时，应加入什么标记物?       。扩增后将产生几种带标记的新链?

Answer

（1）氢键 解旋 （2）TACTAGGAC（3）长度只差一个碱基（或脱氧核苷酸）的DNA链（4）加入胞嘧啶脱氧核苷酸类似物（或ddCMP） 2种

【解析】

试题分析：（1）DNA分子两条链之间通过氢键连接，所以实验操作的第一步是通过加热破坏从而使DNA分子的双链打开，在细胞中这是在解旋酶的作用下完成的。（2）根据碱基互补配对原则，由于模板链的碱基序列是ATGATCCTG，所以对应合成的最长新链的碱基序列是TACTAGGAC。（3）据图分析，要通过以上操作精确地测出DNA链上每一个碱基的位置，电泳分离结果必须能把长度只差一个碱基（或脱氧核苷酸）的DNA链区分开来。（4）由于鸟嘌呤G与胞嘧啶C配对，所以要从电泳结果直接读出上图模板链中鸟嘌呤的位置，进行以上操作时，必须加入带标记的胞嘧啶脱氧核苷酸类似物。由于模板链上只有2个鸟嘌呤，所以扩增后将产生2种带标记的新链。

考点：本题考查DNA复制的相关知识，属于对理解、应用层次的考查。