Question

【生物：选修三现代生物科技专题】某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：

（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量__________。

（2）在动物细胞培养应在含5%CO₂的恒温培养箱中进行，CO₂的主要作用是___________。

（3）在两种细胞生长过程中，当甲细胞铺满瓶壁时，会出现____________现象，若甲细胞传代培养10-50代左右，发现增殖逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的________可能会发生变化。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞相比，可以传代的次数更多的是_______细胞。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用___________消化处理。

（4）理论上，甲细胞可与某种B淋巴细胞合成_____________细胞，从而来制备__________，使患者获得特异性免疫。

Answer

（1）多 （2）维持培养液的pH

（3）接触抑制 遗传特性 甲 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）

（4）杂交瘤细胞 单克隆抗体

【解析】（1） 将动物肝肿瘤细胞与正常肝细胞在相同条件下培养一段时间后，培养液中肝肿瘤细胞会比正常肝细胞多，原因是癌细胞的细胞周期比正常细胞短。

（2）动物细胞培养过程中，需要保持适宜的培养条件，恒温培养箱中CO2的主要作用是维持培养液的pH。

（3）动物细胞在培养容器中培养时具有贴壁生长和接触抑制的特点；动物细胞在最初的培养过程中能很好地保持遗传特性，随着分裂次数的增多，有部分细胞的遗传特性会发生改变，成为癌细胞；癌细胞在体外培养条件下能无限增殖，其传代次数多于正常细胞；动物细胞培养前可用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理组织块，使细胞相互分散。

（4）将癌细胞与浆细胞融合，得到的杂交瘤细胞可同时具有两种细胞的特性，在体外培养条件下既能无限增殖、又能产生单一抗体，杂交瘤细胞可用来制备单克隆抗体。

【考点定位】本题考查动物细胞工程的操作与应用。

【名师点睛】熟记动物细胞培养所需要的条件及过程是正确解答该题的关键

条件：

（1）无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理，添加抗生素，定期更换培养液以清除代谢产物。

（2）营养：除正常的有机和无机营养外，加入血清、血浆等一些天然成分。

（3）适宜的温度和pH：温度为36．5±0．5_℃（哺乳动物），pH为7．2～7．4。

（4）气体环境：含95%空气加5%CO2的混合气体，其中后者的作用是维持培养液的pH。

过程：