Question

【生物—选修1生物技术实践】（15分）某实验小组欲从豆油污染的土壤中筛选出高效降解脂肪的菌株。请回答：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以          为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于         培养基。

（2）为避免培养基污染，需将培养皿呈         状态放置。为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行          处理。为了排除             ，需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照。

（3）为了筛选出菌株，可将适量的        试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围的现象是           ，则说明此种菌能够分泌脂肪酶。

（4）纯化菌种时，为了得到菌落，可采用             法接种于新的培养基平板上。

（5）试验操作应在酒精灯火焰附近进行的原因是             。

Answer

（1）豆油 选择

（2）倒置 梯度稀释 实验组中非测试因素对实验结果的影响（培养基被污染）

（3）苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ） 出现透明圈（不出现橘黄色圈或红色圈）

（4）平板划线 （5）避免周围环境中微生物的污染

【解析】（1）在基本培养基中添加某种成分以促进所需要的微生物生长同时抑制其他微生物生长，称为选择培养基；本实验中要从豆油 污染的土壤中筛选出高效降解脂肪的菌株，应将土壤样品稀释液接种于以豆油为唯一碳源的固体培养基上进行筛选。

（2）为避免培养基污染，需将培养皿呈倒置状态放置。为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液用无菌水进行梯度稀释处理。为了排除实验组中非测试因素对实验结果的影响（如培养基被污染），需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照。

（3）为了筛选出高效降解脂肪的菌株，可将适量的苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围的现象是出现透明圈（不出现橘黄色圈或红色圈），则说明此种菌能够分泌脂肪酶。

（4）纯化菌种时，为了得到菌落，可采用平板划线法接种于新的培养基平板上。

（5）为避免周围环境中微生物的污染，试验操作应在酒精灯火焰附近进行。

【考点定位】微生物的选择培养

【名师点睛】分离提纯微生物需用选择培养基；微生物接种的方法常用平板划线法或稀释涂布平板法，本实验中纯化菌种时，为了得到菌落，可采用平板划线法接种于新的培养基平板上，而不用稀释涂布平板法。