为获得高效降低胆固醇的乳酸菌,科研人员作了如下实验。
(1)取适量发酵酸肉,剪碎并研磨,磨碎后加入________制成1:10稀释液,再梯度稀释到10-6的稀释液,涂布于添加了CaCO3的乳酸细菌培养基(MRS培养基)平板上,在________条件下恒温静置培养48小时。挑取具有________的菌落,用________法接种在MRS培养基上纯化。可通过观察菌落的________判断是否达到了纯化。
(2)纯化后的乳酸菌菌株接种到高胆固醇培养液中培养,一段时间后离心测定________中胆固醇的含量,以________作为对照,测定菌株降胆固醇的能力,筛选出目的菌株。
Graves病(GD)可导致甲状腺功能亢进。研究发现,GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间粘附分子I(ICAM-1),导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体,对治疗GD进行了尝试。
(1)用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠,几周后取这些免疫小鼠的血清,分别加入多孔培养板的不同孔中,多孔培养板中需加入________以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果,选出____________反应最强的培养孔所对应的小鼠M。
(2)实验用骨髓瘤细胞置于_______恒温培养箱中37℃培养,融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养,一段时间后培养基中_______.(填“有”或“无”)骨髓瘤细胞生长,说明培养基符合实验要求。
(3)取小鼠M的脾脏细胞制备成细胞悬液,与实验用骨髓瘤细胞进行融合,用选择培养基筛选得到具有____能力的细胞。将获得的上述细胞在多孔培养板上培养,用ICAM-1检测,从中选择________的杂交瘤细胞,植入小鼠腹腔中__________培养,一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。
(4)若进一步比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用,可将若干GD模型小鼠等分为三组,请补充下表中的实验设计。
红豆杉能产生抗癌药物紫杉醇,为了培养产生紫杉醇的柴胡,科研人员将红豆杉(2n=24)与柴胡(2n=12)进行了不对称体细胞杂交。
(1)科研人员剥离红豆杉种子的胚作为外植体接种于经过_________处理的培养基上,诱导形成愈伤组织。选用胚作为外植体是因为胚的分化程度低,易于_____________。
(2)将红豆杉愈伤组织和柴胡愈伤组织用_____________酶分别处理,各自获得有活力的原生质体。用一定剂量的紫外线照射红豆杉原生质体,破坏部分染色体,与未经紫外线照射的柴胡原生质体用化学诱导剂_____诱导融合,得到融合细胞。
(3)诱导融合后,科研人员只统计了7组染色体数目不大于24条的细胞,如下表所示。
①科研人员筛选的目标细胞不包括染色体数目大于24条的细胞,因为柴胡细胞染色体数为12条,并且红豆杉细胞______________。
②实验时,科研人员判断组号为________的细胞为杂交细胞,并进一步采用PCR方法鉴定这几组细胞。PCR扩增DNA时,需要分别以________为引物,扩增红豆杉、柴胡和杂交细胞的DNA,观察并比较扩增DNA的电泳结果。
(4)红豆杉和柴胡的________较远,两种植物细胞的染色体间排斥较为明显,应在能够高效合成紫杉醇的杂交细胞中选择________的核基因含量较低的杂交细胞进行培养。
白僵菌可感染农业害虫,常作为防治害虫的菌剂。由于白僵菌对除草剂草丁膦敏感且杀死害虫的能力较弱,科研人员对其进行基因工程改造,流程如图所示。
(1)苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白,能有效杀死害虫。已知该基因的全部序列,科研人员通过________法和PCR技术获得大量毒蛋白基因片段。据图分析,将毒蛋白基因和质粒连接获得重组质粒l的过程需要用到的工具酶是_____。
(2)重组质粒1和Bar基因(草丁膦抗性基因)各自用XbaI酶处理,得到酶切片段。重组质粒l的酶切片段再用去磷酸化酶处理,使末端游离的磷酸基团脱离,目的是防止________。将未用去磷酸化酶处理的Bar基因与重组质粒l连接,获得重组质粒2。获得的重组质粒2的是下图中的_______________。
(3)将重组质粒2与感受态的白僵菌菌液混合进行转化,重组质粒2在白僵菌细胞内被修复。一段时间后用含有_________的平板培养基进行筛选,获得含有Bar基因的重组白僵菌。
(4)提取上述重组白僵菌全部mRNA,加入________酶,获得cDNA,再加入毒蛋白基因引物进行PCR反应,用以检测毒蛋白基因是否完成___________。
(5)科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上,以此饲喂饥饿处理的害虫,记录单位时间内的_________,以判断重组白僵菌的杀虫效果。
某研究小组探究了不同浓度K2CrO4溶液处理对某植物根尖分生组织细胞有丝分裂的影响,实验结果如下表所示。
(1)制作根尖细胞有丝分裂装片的流程为:剪取根尖,放入盐酸和酒精的混合液中______8-12min;将根尖放入清水中漂洗10min;用______溶液对根尖染色15min,压片后制成装片。
(2)镜检时,每个根尖装片大约统计600个细胞,这样每种浓度K2CrO4溶液处理条件下应保证统计_____个根尖装片,以降低实验误差。
(3)实验结果表明,K2CrO4溶液对有丝分裂、染色体畸变和产生微核的影响依次是_______(填“促进”、“抑制”或“无影响”)。
(4)K2CrO4处理使染色体发生断裂时,带有着丝粒(着丝点)的染色体在完成复制后,姐妹染色单体会在断口处黏合形成“染色体桥”,以下均为有丝分裂____________期图,能观察到“染色体桥”的图像是_____________。
断裂后,没有着丝粒的染色体片段不能被________牵引,在有丝分裂_______期核膜重建后,会被遗留在细胞核外,而成为微核。
为研究铁皮石斛的光合特性,研究人员测定了铁皮石斛在光、暗条件下的CO2吸收速率,结果如下图。
(1)在有光条件下,铁皮石斛吸收的CO2在_________中被固定为_________,然后生成糖类等有机物。
(2)虽然黑暗条件下,铁皮石斛通过_____产生并释放CO2,但实验结果显示,暗期铁皮石斛CO2吸收总量始终_________,这不同于一般植物。
(3)科研人员进一步测定了铁皮石斛中酸性物质的含量变化,结果发现,酸性物质在暗期上升,光期下降,推测CO2能够在暗期转化为________储存起来,在光期_______。但是在暗期,并不能将CO2转化为糖类等光合产物,原因是________。
(4)为了研究这种作用的生理意义,科研人员测定了铁皮石斛气孔开放程度变化情况,结果如下图。
结果发现,暗期气孔开放程度________光期。综合上述结果推测,铁皮石斛在光期条件下吸收CO2不足,而暗期可以________,进而提高光合速率。