Question

已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：

（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用于             染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用            （填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。

（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以           为碳源的固体培养基进行培养，此外培养基中的营养成分还应该含有水、氮源和          。

（3）若要测定培养液中微生物B的活菌数量，可选用             法进行计数，统计的数目往往比活菌的实际数目偏       。

（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，       ℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕        ℃设计后续实验。

Answer

（1）苏丹Ⅲ染液或者苏丹Ⅵ染液 萃取法

（2）脂肪 无机盐

（3）稀释涂布平板法 低

（4）45 40

【解析】（1）脂肪可被苏丹Ⅲ（苏丹Ⅳ）染成橘黄色（红色）故显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染色。因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，应用压榨法或萃取法提取。

（2）筛选产脂肪酶的微生物B时，应该使用只有目的菌能够生存的，其他微生物不能生存的选择培养基，培养基中应该添加脂肪作为唯一碳源。培养基中的营养成分还应该含有水、氮源和无机盐。

（3）测定微生物的数量，可以在显微镜下用稀释涂布平板法进行计数。统计的数目往往比活菌的实际数目偏低。

（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，45℃条件下该酶活力最小，该酶的最适温度为40℃左右，为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕40℃设计后续实验。

【考点定位】微生物的利用；检测脂肪的实验

【名师点睛】解答该题重点要掌握以下几点：1、植物有效成分的提取可用蒸馏法、压榨法或萃取法，因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，应用压榨法或萃取法提取。2、植物油中不含矿物质元素，只为微生物提供碳源，培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌，测定微生物的数量，可以用显微镜直接计数或稀释涂布平板法。3、分离出的脂肪酶需要对其活性进行检测，以确定其实用价值。