Question

微生物培养与分离技术是生物学中重要的实验技术。根据有关微生物的知识，分析回答问题：

（1）培养基的制备需经过计算、称量、溶化和A：__   __、B:___  __等过程，上述过程中需要在超净工作台上操作的是_______。

（2）纯化菌种时为得到单菌落，常采用的接种方法是平板划线法和D:___  __法，其中需用接种环进行操作的是__________。

（3）为达到筛选土壤中分解尿素细菌目的，平板内固体培养基应以尿素作为唯一的_       __，培养基中加入_____ ___指示剂培养后，若变红以鉴定其中含有所需细菌。若筛选纤维素分解菌，在选择培养后须进行E:___     _和F:___   ___过程，一般通过观察_____  __的有无挑选出所需菌种。

Answer

（1）灭菌 倒平板 倒平板

（2）稀释涂布平板法 平板划线法

（3）氮源 酚红 梯度稀释 涂布平板 透明圈

【解析】（1）培养基的制备需经过计算、称量、溶化和灭菌、倒平板等过程，上述过程中需要在超净工作台上操作的是倒平板，防止杂菌的污染。

（2）纯化菌种时为得到单菌落，常采用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法，其中需用接种环进行操作的是平板划线法，即通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面。

（3）为达到筛选土壤中分解尿素细菌的目的，平板内的固体培养基应以尿素作为唯一的氮源，培养基中加入酚红指示剂培养，由于尿素分解菌能将尿素分解为氨，使pH升高。因此，若出现变红现象，说明其中含有所需细菌。若筛选纤维素分解菌，在选择培养后须进行梯度稀释和涂布平板过程，一般通过观察透明圈的有无挑选出所需菌种。

【考点定位】微生物的分离和培养；以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量

【名师点睛】知识点拨：（1）制备培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，微生物接种的核心是防止杂菌的污染，保证培养物的纯度；（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，前者是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面；后者是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养；（3）从土壤中分离尿素分解菌的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株．尿素分解菌产生的脲酶能够将以尿素为唯一氮源的培养基中的尿素分解为氨，使pH升高，培养基中加入酚红指示剂后呈红色。