Question

某实验小组欲从豆油污染的土壤中筛选出高效降解脂肪的菌株。请回答：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以          为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于           培养基。

（2）为避免培养基污染，需将培养皿呈            状态放置。为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行                处理。为了排除              ，需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照。

（3）为了筛选出菌株，可将适量的                 试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围的现象是                  ，则说明此种菌能够分泌脂肪酶。

（4）纯化菌种时，为了得到菌落，可采用             法接种于新的培养基平板上。

（5）试验操作应在酒精灯火焰附近进行的原因是               。

Answer

（1）豆油 选择

（2）倒置 梯度稀释 实验组中非测试因素对实验结果的影响（培养基被污染）

（3）苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ） 出现透明圈（不出现橘黄色圈或红色圈）

（4）平板划线

（5）避免周围环境中微生物的污染

【解析】（1）由题意可知，欲从豆油污染的土壤中筛选出能高效降解脂肪的菌株，所以应将土壤样品稀释液接种于以豆油为唯一碳源的固体培养基上；从功能上讲，该培养基属于选择培养基。

（2）为避免培养皿污染，需将培养皿呈倒置状态放置；为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行系列稀释（或“梯度稀释”） 处理；设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照，其目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响（培养基被污染），提高实验结果的可信度。

（3）脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色）。而能高效降解脂肪的菌株所分泌的脂肪酶能够催化脂肪水解，在培养基中的该菌落的周围就会出现透明圈。因此，为了筛选出能高效降解脂肪的菌株，可将适量的苏丹Ⅳ（或“苏丹Ⅲ”）试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围出现透明圈（不出现红色圈或橘黄色圈），则说明此种菌能够分泌脂肪酶。

（4）在固体培养基上纯化菌种时，为了得到单菌落，可采用平板划线法。

（5）试验操作应在酒精灯火焰附近进行的原因是避免周围环境中微生物的污染。

【考点定位】微生物的分离和培养、培养基对微生物的选择利用