Question

（2013春•东莞校级月考）如图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答．

（1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？      为什么？      ．

（2）过程②必需的酶是      酶，过程③在体外需要的条件是      ，过程④在体外必需的酶是      酶，上图用      （方法）来获得目的基因．

（3）在利用A、B获得C的过程中，必须用      切割A和B，使它们产生      ，再加入      ，才可形成C．

（4）C的组成除必须含有      、      、复制原点外，还必须有      和      ．

（5）图中的D是基因工程中的受体细胞，为了使过程⑧更易进行，可      处理D．

Answer

（1）不能 由于基因选择性表达，人的皮肤细胞胰岛素基因不能表达得到胰岛素

（2）逆转录 加热 热稳定DNA聚合酶（Taq酶） 反转录法

（3）同一种限制酶 相同的黏性末端 DNA连接酶

（4）目的基因 标记基因 启动子 终止子

（5）Ca2+

【解析】

试题分析：（1）不能用皮肤细胞，过程1是从细胞中提取mRNA，这需要胰岛细胞中提取出mRNA．人体的皮肤细胞高度分化，皮肤细胞没有选择性表达出胰岛素基因的mRNA，所以不能表达出胰岛素的mRNA．

（2）过程②表示的为逆转录过程，遗传信息传递为mRNA→DNA，因此需要的酶为逆转录酶．过程③④⑤表示目的基因的扩增过程，在体外进行就是PCR技术，PCR技术中的过程③表示高温解链，即在体外需要的条件是加热，过程④在体外必需的酶是热稳定DNA聚合酶（Taq酶）．

（3）在构建基因表达载体的过程中，需要用同一种限制酶切割目的基因和质粒，使它们产生相同的黏性末端，再加入DNA连接酶，才可形成重组质粒．

（4）基因表达载体的组成除必须含有目的基因、标记基因、复制原点外，还必须有启动子和终止子．

（5）基因工程中，以细菌为受体细胞时，需要Ca2+处理受体细胞，使其变为感受态细胞．

故答案为：

（1）不能 由于基因选择性表达，人的皮肤细胞胰岛素基因不能表达得到胰岛素

（2）逆转录 加热 热稳定DNA聚合酶（Taq酶） 反转录法

（3）同一种限制酶 相同的黏性末端 DNA连接酶

（4）目的基因 标记基因 启动子 终止子

（5）Ca2+

考点：基因工程的原理及技术．