Question

请分析回答下列有关现代生物科技方面的问题：

（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：第一步是目的基因的获取，第二步是基因表达载体的构建，第三步是将目的的基因导入受体细胞，第四步是        。

①通常在第一步和第二步的操作中都需要的工具酶是        。

②利用PCR技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热形成单链并与引物结合，在     酶的作用下延伸形成DNA。

③采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞后，培养该细胞再生成植株的过程中，往往需要使用植物激素，人为地控制          和          过程。

④蛋白质工程的基本程序是：

预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的         序列→找到相对应的          序列。

（2）请回答下列有关单克隆抗体制备的问题：

①与动物细胞融合过程相比，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用      处理。作用是去除          ,诱导原生质体融合的化学方法是用        。

②经人工诱导后，骨髄痛细胞和产生免疫反应的动物的脾脏细胞中的B淋巴细胞融合。由于可能产生多种融合细胞，因此还需对融合细胞用         进行筛选，目的是选出         它的特点是            。单克隆抗体的特点是        。

Answer

（1）目的基因的检测与鉴定

①限制性核酸内切酶（或限制酶）

②热稳定 DNA聚合

③脱分化 再分化

④氨基酸 脱氧核苷酸

（2）①纤维素酶和果胶酶 细胞壁 聚乙二醇

②选择性培养基 杂交瘤细胞 既能迅速无限增殖，又能产生专一抗体 特异性强、灵敏度高、并可大量制备

【解析】

（1）基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。

①基因工获取目的基因，需要限制酶，基因表达载体的构建过程首先需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，其次需要DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子，因此通常在第一步和第二步的操作中都需要的工具酶是限制性核酸内切酶。②利用PCR技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热形成单链并与引物结合，在DNA聚合酶的作用下延伸形成DNA，这种DNA聚合酶具有热稳定性。③采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞后，培养该细胞再生成植株的过程中，往往需要使用植物激素，人为地控制细胞的脱分化、再分化。

④蛋白质工程的基本原理是：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的序脱氧核苷酸。

（2）①植物体细胞杂交过程中，在细胞融合之前要用纤维素酶和果胶酶处理，以去除细胞壁，诱导原生质体融合的化学方法是用聚乙二醇。

②经人工诱导后，骨髓瘤细胞和产生免疫反应的动物的脾脏细胞中的B淋巴细胞融合，由于可能产生多种融合细胞，因此还需对融合细胞进行选择性培养基，来筛选和检测，从而获得符合要求的杂交瘤细胞。通过能产生单一抗体的效应B细胞（浆细胞）和骨髓瘤细胞杂交，形成的杂交瘤细胞既能产生特定的抗体，又能无限增殖，通过培养杂交瘤细胞获得的抗体即为单克隆抗体，单克隆抗体的特点是灵敏度高、专一性强，可大量制备。

【考点定位】基因工程、单克隆抗体、植物体细胞杂交