Question

油菜由白菜（2n=AA=20）和甘蓝（2n=CC=18）天然杂交进化而来，如何在短时间内提高油菜籽的产油率、改善油菜籽的品质是科学家研究的热门话题。请分析回答下列问题：

（1）在利用植物体细胞杂交技术将白菜和甘蓝体细胞融合前，需用__________除去各自的细胞壁，常用化学促溶剂              促进二者融合成杂种植物细胞。在由杂种植物细胞生成再生植株的过程中，细胞内最多含有             个染色体组。

（2）研究发现，油脂的生成量与蛋白质的合成量呈反相关，主要控制基因（独立遗传）及代谢路径如右图。

①叶肉细胞中的丙酮酸主要来自            。

②高油油菜的基因型为               。基因型为MmNn的油菜自交，后代中宜于留种的纯合高油油菜占。

（3）油酸为不饱和脂肪酸，能降低人体血液中胆固醇、减少患心血管病风险。F基因控制合成的油酸酯氢酶催化油酸形成饱和脂肪酸，转反义F基因油菜能提高菜籽油中油酸含量。

①利用油菜细胞的染色体DNA直接获取大量F基因的方法为                。

②构建反义F基因表达载体时，需要       酶；将反义F基因表达载体导入油菜根细胞的方法除基因枪法外，还可利用            。从右图看出，构建反义F基因表达载体时没有设计标志基因，目的是       。

③Le启动子为种子特异性启动子，将F基因反向连接在Le启动子之后构建了反义F基因。检测转反义F基因油菜细胞内F基因转录的mRNA含量，结果表明，因杂交形成双链RNA，细胞内F基因的mRNA水平下降。由此推测，反义F基因的转录抑制了F基因的              （填复制、转录或翻译）过程。若F基因转录时，两条单链（a₁、a₂）中a₁为转录的模板链，推测反义F基因转录时的模板链为                。

Answer

（1）纤维素酶和果胶酶 PEG（聚乙二醇） 8

（2）①葡萄糖的酵解（分解）②MMnn、Mmnn 1/16

（3）①PCR （2分）

②限制酶、DNA连接酶 农杆菌转化（花粉管通道法） 无标记基因表达产物，有利于食品安全（2分）

③翻译（2分） a2（2分）

【解析】

试题分析：

（1）植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，因此用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁；促进植物细胞融合的方法有物理方法和化学方法，化学方法采用的PEG；杂种细胞含有4个染色体组，杂种细胞在有丝分裂后期含有8个染色体组。

（2）①葡萄糖有氧呼吸第一阶段的产物是丙酮酸、少量【H】、释放少量能量；②具题意知，高油油菜蛋白质应含量降低，所以高油油菜基因型为MMnn、Mmnn；宜留种的为纯合子，MmNn自交后代中MMnn的概率为1/16。

（3）①PCR常用于大量扩增DNA；②基因工程的工具酶有限制酶、DNA连接酶，基因表达载体导入植物细胞的常用方法为农杆菌转化法；没有设计标志基因植物就无标记基因表达产物，有利于食品安全；③细胞内F基因的mRNA水平下降，mRNA是翻译的模板，因此该基因抑制的是翻译；反义F基因转录的模板链为a2，形成的mRNA可以与F基因转录的mRNA配对，抑制其翻译。

考点：本题考查基因工程、植物体细胞杂交的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。