Question

农业科技工作者在烟草中找到了一抗病基因，现拟采用基因工程技术将该基因转入棉花，培育抗病棉花品系。请回答下列问题：

（1）要使运载体与该抗病基因连接，首先应使用                    进行切割。假如运载体被切割后，得到的分子末端序列为，则能与该运载体连接的抗病基因分子末端是   。（从以下选择中选择）

（2）切割完成后，采用                         将运载体与该抗病基因连接，连接后得到的DNA分了称 为                  。

（3）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，应该用                           作为探针。

（4）科学家发现转基因植株的抗病基因的传递符合孟德尔遗传规律：

①将该转基因植株与              杂交，其后代中抗病类型与不抗病类彻的数墦比为1:1。

②若该转基因植株自交，则其后代中抗病类型与不抗病类型的数量比为             。

③若将该转基因植株的花药作离体培养，则获得的再生植株群体中抗病植株占         。

Answer

（1）限制性内切酶（限制酶）A

（2）DNA连接酶 重组DNA 分子

（3）放射性同位素标记的抗病基因

（4）①非转基因植物 ②3： 1 ③1/2

【解析】

（1）构建基因表达载体时，需先用限制酶切割运载体和含有目的基因的外源DNA分子，限制酶的作用部位是磷酸二酯键．含有相同黏性末端的DNA分子片段才能在DNA连接酶的作用下连接起来，若载体被切割后，得到的分子末端序列为，则能与该载体连接的抗病基因分子末端是。

（2）切割完成后，需采用DNA连接酶将载体与该抗病基因连接形成重组DNA分子。

（3）根据题意，目的基因是抗病基因，所以用放射性同位素标记的抗病基因作为探针。

（4）已知转基因植株的抗病基因的传递符合孟德尔遗传规律，假设转入基因为A，没有为aa，则：

①将该转基因植株（Aa）与非转基因植株（aa）杂交，其后代中抗病类型与不抗病类型的数量比为1：1。②若该转基因植株（Aa）自交，则其后代中抗病类型与不抗病类型的数量比为3：1。③若将该转基因植株的花药作离体培养，配子中A：a=1：1，则获得的再生植株群体中抗病类植株占50%。

【考点定位】基因工程的原理及技术

【名师点睛】1、基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体。

2、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。

3、植物组织培养技术的原理是植物细胞具有全能性。