Question

有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如下图甲、乙所示。

（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、          四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是                  。

（2）与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和        ，这些植物激素一般需要事先单独配置成      保存备用。

（3）纯化菌株时，通常使用的划线工具是        。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有                ，                   。

（4）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是                                                                    ，该实验设计是否合理？为什么？                                                                                  。

Answer

（1）氮源和无机盐 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖

（2）细胞分裂素 母液

（3）接种环 接种环灼烧后未冷却 划线未从第一区域末端开始

（4）目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质 不合理 缺少空白对照

【解析】

试题分析：

（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质包括碳源、水、氮源和无机盐四类；选择培养基只允许特定种类的微生物生长，又能抑制或阻止其他种类微生物生长，因而必须以苯磺隆为唯一碳源，只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖。

（2）植物组织培养过程中启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素是生长素和细胞分裂素；为了避免每次配制时都要称量，可将植物激素先单独配制成母液保存备用。

（3）纯化菌株时，通常使用的划线工具是接种环（或接种针）；接种环在平板内的每一次划线前，都要先灼烧灭菌冷却后再划线，而且要从上一次划线末端而非空白处划线。第二划线区域只有第一条线无菌落，而其他的划线上却有菌落，很可能是因为接种环在灼烧后末冷却，第一次划线时将菌种烫死，而后接种环冷却，能正常划线；也可能是第一次划线时划线未从第一区域末端开始，使接种环上无菌种。

（4）图乙实验为取得菌种培养液过滤后离心上清液中加入蛋白酶溶液，测得其对苯磺隆的降解率。蛋白酶是用于水解上清液中的某蛋白质的，由此可判定实验假设是目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质，若用蛋白酶处理后，可使该蛋白质分解，苯磺隆降解率下降，则假设成立；但是尚需设置不加入蛋白酶的空白对照组实验，否则没有说服力，因而不合理。

考点：微生物的分离和培养